1984年,人类首例冻融胚胎移植(frozen-thawed embryo transfer, FET)后的小孩在英国出生。此后,胚胎冷冻技术迅速发展,大量人类合子、卵裂期胚胎、囊胚被用于冷冻保存。FET可提高积累妊娠率、降低多胎率,同时预防重度卵巢过度刺激综合征的发生,已成为现代辅助生殖技术(assisted reproductive technology, ART)的一项常规操作。目前,欧洲国家1-4%的新生儿来自ART,而FET周期数已占ART周期数的20%,FET子代已成为ART子代不容忽视的重要组成部分。由于ART各项技术均缺乏实验室基础研究及其非自然生殖的特性,ART的安全性一直是大家关注的焦点,现关于FET子代的健康研究已有一些报导。研究指出,与新鲜胚胎移植出生的新生儿相比,FET新生儿的结局相对令人欣慰,单胎平均出生体重较前者高,早产(preterm birth, PTB)和低出生体重(low birthweight, LBW)的风险有所降低。在卵裂期胚胎冷冻和解冻过程中,一部分会经受住冻融的考验,卵裂球保持完整；一部分会因细胞溶解或坏死丢失部分卵裂球；还有部分胚胎会在这个过程中退化。由于胚胎早期的卵裂细胞均为干细胞,具有全能性,即使丢失部分卵裂球,胚胎仍有能力发育成一个完整的个体。目前认为解冻后至少50%的卵裂球保持完整,且具有分裂能力的冻融胚胎适合于移植。卵裂球丢失是卵裂期胚胎冻融过程中的一种常见现象,约50%的冷冻胚胎会发生不同程度的卵裂球损伤,以往的研究仅关注于此种现象对胚胎种植潜能的影响。在对人类和小鼠胚胎的研究中均发现与卵裂球完整的冻融胚胎相比,卵裂球丢失胚胎的种植能力显著降低。移除了损坏的细胞物质后,胚胎的种植率和妊娠率均得到了一定程度的提高。胚胎植入前阶段是其发育的关键时期,包括基因组的激活、基因印记状态的维持、非印记基因第二次去甲基化和甲基化的重建都发生于此阶段。一些动物实验表明发生于此期的不良事件,例如胚胎体外培养、卵裂球活检、胚胎冷冻保存,都会对其后续的生长发育产生深远影响,甚至影响子代成年后的健康。而卵裂球丢失的冷冻胚胎就经受了一系列不良事件,除了冻融程序本身导致胚胎细胞的形态和代谢的改变外,胚胎尚经历了部分物质的减少,且损伤细胞释放的物质可能对余下卵裂球产生毒性作用,干扰胚胎的正常种植和发育。因此,卵裂球丢失现象对FET子代的短期和长期影响不容忽视,但目前尚无此方面的国内外文献报导。所以,本研究致力于探索人类早期卵裂胚胎冻融过程中卵裂球丢失对FET子代安全性的影响,以卵裂球完整的冻融胚胎移植后出生的子代为对照。先对卵裂球丢失胚胎移植后的妊娠周期的早期妊娠结局和单胎新生儿结局进行临床分析；接着对卵裂球丢失胚胎发育而来的单胎子代的生长发育和智力发育情况进行评估。从而在新生儿和幼年儿童两个层面系统评估卵裂球丢失胚胎的子代安全性。第一部分卵裂球丢失和卵裂球完整的冻融胚胎移植后早期妊娠结局和单胎新生儿结局比较目的：研究人类早期卵裂胚胎冻融过程中卵裂球丢失是否会对早期妊娠结局和单胎的新生儿结局产生影响。对象与方法：回顾性分析2001年1月至2010年4月在我院生殖中心行FET并妊娠的病例,所有移植胚胎均为卵裂球丢失胚胎的周期纳入实验组(n=220),所有移植胚胎均为卵裂球完整胚胎的周期纳入对照组(n=687)。比较两组之间早期妊娠结局及活产单胎的新生儿结局是否存在差异。并进一步分析了影响单胎新生儿出生体重的因素。结果：实验组220例妊娠周期与对照组687例妊娠周期相比,前者生化妊娠率显著增高(8.6%比4.1%,P=0.008),出生子代的多胎比率显著降低(28.2%比48.6%,P<0.001)。校正一些干扰因素的影响后,实验组125例单胎的平均出生体重显著低于对照组338例单胎的平均出生体重(3229.6±510.1g比3338.5±473.8g,P=0.014)。但两组单胎的孕周无显著差异,实验组单胎早产儿、低出生体重儿、小于胎龄儿的风险等也未见增高。结论：我们的研究进一步证明了卵裂球丢失会降低胚胎的发育潜能,且影响胚胎的后续生长发育,导致单胎子代的较低出生体重。第二部分卵裂球丢失和卵裂球完整冻融胚胎发育而来的单胎子代儿童期生长发育和智力发育的比较目的：研究人类早期卵裂胚胎冻融过程中卵裂球丢失对单胎子代生长发育及智力发育的影响。对象和方法：研究对象为2001年8月一2008年8月在我院生殖中心行FET后出生的单胎子代,卵裂球丢失胚胎发育而来的子代纳入实验组,卵裂球完整胚胎发育而来的子代纳入对照组。通过信件或电话联系,动员其父母参加我院的试管婴儿随访工作。测量儿童的身高、体重,以WHO(2006年)新发布的参考值及评价标准给予体格发育评估。对于不同年龄的儿童,选择最适合的测试量表,包括Gesell发育量表、中国-韦氏幼儿智力量表、中国-韦氏儿童智力量表,计算各自的发育商或智商,以评估其生长发育和智力发育情况。结果：实验组42个、对照组75个单胎子代参加随访,两组儿童的体格发育参数无明显差异。共22例实验组单胎和48例对照组单胎进行了Gesell发育指数测试,校正父母学历、是否为低出生体重等干扰因素的影响后,发现两组儿童的适应性、精细动作、大运动和语言发育商均无显著差异,实验组子代个人-社交能力显著低于对照组。共20例实验组单胎和27例对照组单胎进行了韦氏智力测试,校正上述干扰因素的影响后,两组儿童的言语智商、操作智商和总智商也无显著差异。多元线性回归分析显示,母亲文化水平显著影响适应性发育商,父亲文化水平对语言发育商、个人-社交发育商及言语智商、操作智商、总智商均有显著影响。结论：本实验小样本的研究中,并未发现卵裂球丢失对子代儿童期的生长发育和智力发育产生明显不利影响。而父母的认知能力对子女的长远智力发育具有更重要的作用。