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目的:内源性大麻素通过激活G蛋白耦连的大麻素受体(CB1和CB2)而发挥对神经、心血管、免疫等系统的调节作用。此外,内源性大麻素也具有抗炎、镇痛等多种医疗用途,但其生理效应尚未完全揭示。热应激反应是细胞最重要的应激保护机制之一,主要通过激活热休克转录因子1而显著增强包括分子伴侣机制在内的多种保护机制。而内源性大麻素对热应激反应有无调节效应及其机制如何,迄今国内外尚无研究报道。本研究在文献调研的基础上,初步推测大麻素可能通过其受体对热应激反应产生调节作用。迄今国内外尚无研究报道。本研究在文献调研的基础上,初步推测大麻素可能通过其受体对热应激反应产生调节作用。为证实这一假设,本研究拟以大鼠胶质瘤细胞株作为研究对象,观察内源性大麻素是否对其热应激反应具有调节效应,并探索其相应的受体机制;以期初步阐明内源性大麻对热应激反应的调节效应及机制,为内源性大麻素的效应及机制研究提供新思路和突破点。方法:选用大鼠胶质瘤C6细胞为实验模型;实验组共分4类,即热应激组(42℃水浴1h)、热应激+内源性大麻素(2-AG)处理组、热应激+2-AG + CB1受体特异性拮抗剂(AM251)或CB2受体特异性拮抗剂(AM630)处理组、以及各自的对照组;设3h、6h、12h、24h等4个时相点。①采用RT-PCR技术,检测热应激、热应激+2-AG、热应激+2-AG+大麻素受体抑制剂处理后HSP70 mRNA表达水平。②采用Western Blot技术,检测热应激、热应激+2-AG、热应激+2-AG+抑制剂处理后HSP70蛋白表达水平。结果:①C6细胞热应激处理后,分别于3h、6h、12h、24h检测HSP70 mRNA及蛋白的变化。结果显示,热刺激后3h、6h、12h、24h,HSP70 mRNA和蛋白表达水平均较对照组显著增高,12h时增加最为显著。②选择热应激后12h为观察时相点,以10-7mol/L、10-6mol/L、10-5mol/L三种不同浓度的2-AG进行处理,结果发现10-5mol/L 2-AG对热刺激1h后HSP70 mRNA、蛋白表达具有显著促进作用;而10-7mol/L、10-6mol/L2-AG则无此促进效应。③观察热刺激及10-5mol/L 2-AG处理后,不同时相点HSP70 mRNA和蛋白的表达情况,结果发现2-AG处理后HSP70 mRNA和蛋白表达在6h到达高峰,无2-AG处理对照组HSP70 mRNA和蛋白在12h到达高峰。④以CB1受体特异性拮抗剂(AM251)和CB2受体特异性拮抗剂(AM630)处理细胞后,检测2-AG对HSP70 mRNA、蛋白表达的影响,结果显示,AM251阻断了2-AG对HSP70 mRNA和蛋白的促进效应,而AM630无此效应。结论:一定浓度的内源性大麻素2-AG对热刺激处理的C6细胞内HSP70基因的表达有明显促进效应,表明2-AG可以参与调控细胞热应激反应;此促进效应可被CB1特异性受体抑制剂AM251所抑制,表明2-AG的抑制效应是由CB1,而非CB2,信号通路所介导。本研究结果揭示了2-AG可能具备调控热应激效应的能力。