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红霉素发酵生产属于好氧发酵，需要充足的氧气供应。透明颤菌血红蛋白(VHb)是迄今为止发现的唯一一种原核生物血红蛋白，它与真核生物的血红蛋白具有较高的同源性，在贫氧条件下能够促进细胞的生长和蛋白质的合成。利用VHb在糖多孢红霉菌中表达透明颤菌血红蛋白基因(vgb)，解决红霉素发酵生产中的供氧问题，将对工业生产产生巨大的科学意义，并可能带来巨大的经济效益。本文的研究从透明颤菌的筛选入手，并对其进行了生理和生化测试。根据vgb的核酸序列设计引物，扩增出vgb基因，并与质粒pQE-30连接，构建载体pQEV，将其转入大肠杆菌中，并通过SDS-PAGE和Westernblotting分析证明vgb基因在大肠杆菌中得到了克隆和表达。对转入大肠杆菌的pQEV中的DNA序列进行测序，将测序结果与已发表的vgb基因序列进行比较，同源性为97％，证明是vgb基因。根据报道的核酸序列设计引物，分别通过PCR反应扩增PmerR启动子和糖多孢红霉菌染色体上的两段DNA片段，与之前扩增的vgb以及从质粒pBI101中酶切获得的GUS基因共五段碱基序列，首先在体外连接成片段3，然后再与载体pBluescriptSK经T4连接酶连接，得到构建的载体pBlueV。对pBlueV进行KpnⅠ和BstXⅠ双酶切，将含有vgb的一段通过电穿孔转化法转入糖多孢红霉菌中。提取糖多孢红霉菌转化菌株的基因组DNA，经MstⅠ和BglⅠ酶切消化，以扩增的片段1为探针，进行Southernblotting检测，实验结果证明，vgb基因已经整合到了糖多孢红霉菌的染色体中。Westernblotting分析进一步证明，重组菌株能够合成血红蛋白。本文就vgb基因表达对糖多孢红霉菌发酵产量的影响进行了研究。本文利用基因重组技术优化红霉素发酵菌株，对于红霉素的发酵生产具有重大的意义。