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D-泛解酸内酯水解酶可以专一性拆分DL-泛解酸内酯,生成D-泛解酸。D-泛解酸是合成合成维生素类药物D-泛醇及神经营养药D-泛酸钙的前体。本文以本实验室筛选的高产D-泛解酸内酯水解酶的菌株腐皮镰孢菌(Fusarium proliferatum var. proliferatumAS3.4738)为材料发酵产菌丝体,研究了从菌丝体提取D-泛解酸内酯水解酶以及固定化该酶的方法,明确了固定化酶的酶学性质并对固定化酶的转化工艺条件进行了优化,从而为该酶的工业化应用奠定了基础。实验用液氮研磨法、高压均质法和超声破碎法对菌丝体进行破壁处理,结果显示三种方法处理所得的酶活提取率分别为：57.58%,56.97%和53.78%。然后进行超滤浓缩,粗酶液由0.013U/mL提高到0.04U/mL,酶活损失率为3.5%。实验选用了6种有代表性的树脂D-3520、D-152、D-380、N-KA9、AB-8和ES-V-1进行研究。通过实验发现D-380吸附D-泛解酸内酯水解酶的效果最好。用它固定化酶,酶活可达4U/g树脂,酶活回收率达到66.7%。通过比较戊二醛和THP的交联效果,发现戊二醛的交联效果优于THP。使用前者的固定化酶活是后者的4.76倍。优化的戊二醛固定化条件为：加酶量为6U/g树脂,吸附pH7.5,吸附温度30℃,吸附时间4h；戊二醛(终)浓度0.1%,交联时间1h,交联温度4℃。采用单因素的实验方法确定了固定化酶的酶学性质：固定化D-泛解酸内酯水解酶最适温度40℃,比游离酶提高了10℃；其热稳定性和pH稳定性均有一定的提高；固定化酶动力学常数Km为28.2mmol/L,比报道的D-泛解酸内酯水解酶的Km3.6mmol/L(DL-泛解酸内酯)增加6.8倍。采用单因素实验和正交实验结合的方法,优化了在最优条件制备的固定化酶水解DL-泛解酸内酯的条件。最适作用温度为35℃；最适作用pH为7.5；最适底物浓度为20%；最适固定化酶浓度为1%;摇瓶最佳转速为180r/min;最佳反应时间为12h。