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研究背景乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一。据美国癌症学会数据统计,2008年全球有1383500名妇女患乳腺癌,死亡病例数为458400。其在妇女恶性肿瘤的发生中占23%,在恶性肿瘤导致妇女死亡的病例中占14%,成为导致妇女死亡的首要原因。近年来,乳腺癌在全球的发病率呈上升趋势,中国成为乳腺癌发病率增长最快的国家之一。乳腺癌病因复杂,大量研究相继发现与之相关的因素因子,但确切发病机制并未解明。干扰素/维甲酸合并诱导的细胞凋亡基因(gene associated with retinoid-IFN-induced mortality, GRIM)是最近发现的一群参与干扰素(IFN)和维甲酸(RA)合并诱导的细胞凋亡基因,其中GRIM-19基因在多种正常组织中表达,参与IFN/RA诱导的肿瘤细胞凋亡,推测它很可能是抑癌基因。该基因参与细胞增殖、凋亡的调控过程,其表达的降低或位点的突变可导致细胞的异常增殖和恶性转化。而转录信号转导子与激活子-3(signal stransducer and activator of sranscription, STAT-3)在乳腺癌中持续性活化,表达水平明显增强,具有促进肿瘤细胞增殖、抑制肿瘤细胞凋亡、促进侵袭转移及免疫逃逸等重要作用。GRIM-19则被认为是STAT-3表达和激活的负性调节因子。本研究旨在分析两种基因在乳腺良性疾病组织及乳腺癌组织中表达的差异,探讨两种基因表达的相关性及其临床意义。研究方法收集济南市中心医院2008年5月-2010年4月行手术切除的乳腺癌标本64例作为乳癌组,其中“非三阴性”乳腺癌54例,“三阴性”乳腺癌10例。同时收集同期乳腺增生及腺瘤组织标本30例作为对照组。临床分期根据UICC(1997年)标准。采用常规免疫组织化学染色SP法,通过统计学进行数据分析。常规甲醛溶液固定,石蜡包埋,41μm连续切片；脱蜡水化,3%过氧化氢浸泡10min,微波修复(GRIM-19采用pH6.0柠檬酸,STAT-3采用pH8.0EDTA),中高火10min,中低火10min,冷却至室温；滴加血清封闭,37℃孵育30min,后滴加一抗,37℃孵育90min,磷酸盐缓冲液(PBS)冲洗后滴加生物素标记的二抗,37℃孵育20min,冲洗,滴加辣根过氧化酶标记的三抗,37℃孵育30min,冲洗后DAB显色,复染封片。阳性对照采用试剂说明标记组织,阴性对照用PBS代替一抗。试剂一抗选用Abcam公司鼠抗人多克隆抗体GRIM-19(ab88094)鼠抗人单克隆抗体STAT-3(ab32500)、SP试剂盒以及二硝基联苯胺(DAB)显色剂购自福州迈新公司。阳性对照采用试剂说明标记组织,阴性对照用PBS代替一抗。免疫组化阳性标准,根据组织细胞中阳性细胞所占比例以及染色深度进行综合评分。阳性细胞所占比例为随机选取5个视野,分别计数100个细胞(图1)。阳性细胞≤10%记为0分,10%～25%为1分,>25%～50%为2分,>50%～100%为3分。染色深度：无色为0分,浅黄色为1分,棕黄色为2分,黄褐色为3分。两个评分标准的乘积作为该标本的积分,≤2分为阴性,>2分为阳性。研究结果1.GRIM-19蛋白在乳癌组中的阳性表达率为29.7%(19/64),明显低于良性对照组中的83.3%(25/30)表达率,两组间差别有显著性(p<0.01)STAT-3蛋白在乳癌组中的阳性表达率为85.9%(55/64),明显高于对照组的10.0%(3/30)表达率,差别有统计学意义(p<0.01)2.GRIM-19在“三阴性”乳腺癌中的表达显著低于在非“三阴性”乳腺癌中的表达(p<0.05)；而在不同年龄、分化程度、淋巴结转移以及雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人表皮生长因子受体(HER-2/neu)的组间表达无统计学差异(p>0.05)。STAT-3在各临床病理指标中的表达均无统计学差异(p>0.05)结论1.GRIM-19在乳腺癌中的表达降低,其表达的缺失可诱导乳腺癌的发生及发展。2.乳腺癌中GRIM-19的表达与STAT-3表达呈负相关。3.“三阴性”乳腺癌中GRIM-19的表达明显降低。