癌胚抗原是广泛存在于消化系统癌、乳腺癌、肺癌患者血清中的一种糖蛋白。它是一种广谱性的肿瘤标志物,是目前临床上公认的、具有明确诊断意义的六种肿瘤标志物之一,对血清中癌胚抗原浓度的实时监测,能够更好地监测病情发展以及对药物疗效进行判断。传统的癌胚抗原的检测方法是免疫,多次洗涤分离操作繁琐、费时。本文以离心沉降为原理,首次将壳聚糖作为密度介质,开发了一种一步检测癌胚抗原的方法,即在预储存有密度介质的14个铅笔型通道的圆盘芯片上,一步离心将待测微珠复合物与溶液分离后,直接进行荧光检测,实现了癌胚抗原高通量的快速、便捷检测。文中首先对用微珠代替常规的孔板固相基底的可行性进行了验证。对percoll、右旋糖酐以及壳聚糖三种密度介质的分离效果进行考察,发现2%的壳聚糖溶液的分离效果明显较其他两种的好。接着对不同倾斜角的芯片通道进行筛选,最终选择0°倾斜角的通道进行实验。对于离心所涉及的离心转速、离心时间等参数,文中进行了优化,最终在2500r/min的转速条件下进行2.5min的离心,使待测微珠复合物与溶液完全分离。用所开发的方法对癌胚抗原标准品浓度进行测定,得到癌胚抗原浓度与荧光强度关系的标准曲线,在0.7-22.5ng/mL浓度范围内线性良好(R2=0.993)。最后对32例已知浓度的癌胚抗原血清样品进行检测,并与实际浓度进行比较,发现本实验所用方法得到的检测结果与医院所提供结果无显著性差异,因此本文建立的实验方法在临床生物标记物检测方面具有潜在应用价值。