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肿瘤的发生发展是一个多因素作用、多基因参与的复杂的生物学过程。肿瘤细胞最明显的特征就是增殖失控,而在肿瘤细胞内与生长分化有关的信号转导障碍则是导致增殖失控的重要因素。Wnt/β-catenin信号途径是与肿瘤发生发展密切相关的重要信号途径之一。该途径中的Wnt信号通过dishevelled(DVL)转导至胞浆并抑制由β-连环蛋白(β-catenin)、结肠癌抑制因子(adenomatous polyposis coli,APC)、糖原激酶合成酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)和Axin组成的降解复合体对β-catenin的磷酸化,使胞浆内游离β-catenin水平增高并进入细胞核内,与T细胞因子4(T cell factor 4,TCF4)结合,致β-catenin/ TCF4的活性增高;而β-catenin/ TCF4的活性增高是大多数(60%-80%)肿瘤发生发展中的重要事件。分泌型卷曲相关蛋白(Secreted frizzled-related protein,sFRP)为一群可以调控Wnt-frizzled信号传导路径的蛋白质。sFRP含丰富的半胱氨酸区域和亲水羧基末端,但没有跨膜区,不能将其信号传入细胞内,可竞争性地与Wnt分子结合,从而干扰Wnt信号传导途径。肝癌是我国常见恶性瘤之一,死亡率高。本试验选择肝癌细胞株HepG2为细胞模型,以携带sFRP2目的基因的腺病毒感染HepG2细胞,利用多种方法从不同角度检测sFRP2对HepG2细胞增殖、侵袭和迁移等生物学行为的影响,旨在了解sFRP2抗肿瘤的可能性及其作用机理。本课题采用MTT法测定sFRP2对HepG2细胞增值的影响;流式细胞术检测感染前后处于各细胞周期的比率;免疫组织化学法观测感染前后CD44、E-cadherin、CD82和EMMPRIN的表达情况,判断sFRP2对细胞侵袭和迁移能力的影响;Western Blotting确定感染前后的β-catenin表达水平;Transwell侵袭小室测定细胞感染前后的转移迁移能力。全文主要结果及结论如下:Western Blotting证明感染前后的HepG2细胞均有β-catenin的表达。MTT法说明实验组较正常组和对照组细胞增殖速度明显降低,均有显著性差异(P>0.01)。FCM检测结果证明感染后处于G0/G1期细胞比例显著增加,说明增殖速度明显降低。免疫组织化学检测结果显示sFRP2作用于HepG2细胞后,使肿瘤转移抑制因子CD44、E-cadherin和CD82的表达均显著增强;而有助于癌细胞的侵袭转移的EMMPRIN蛋白表达显著减弱,从分子水平上解释了sFRP2如何抑制肿瘤浸润和转移。Transwell侵袭小室实验表明sFRP2作用后的HepG2细胞转移能力明显受到抑制,穿膜细胞数显著减少,说明sFRP2可以抑制HepG2细胞转移。总的结果提示,携带目的基因sFRP2的腺病毒成功感染HepG2细胞,并对HepG2肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移具有一定的抑制效应。