外伤、术中大出血等导致的失血性休克是临床上常见的急危重症,失血性休克后引起的急性肾损伤（acute kidney injury,AKI）是常见的并发症之一,已有研究表明,失血性休克后肠淋巴液（post-hemorrhagic shock mesenteric lymph,PHSML）回流在失血性休克后肾脏损伤的发病过程中具有重要作用,阻断PHSML回流可减轻肾脏损伤,其机制与减轻肾脏炎症反应、氧化应激等因素有关。肾素-血管紧张素系统（renin-angiotensin system,RAS）是人体中重要的内分泌系统之一,RAS包含两条关键轴:血管紧张素转化酶（angiotensin-converting enzyme,ACE）-血管紧张素（angiotensin,Ang）II-Ang II 1型受体（Ang II 1 receptor,AT1R）和ACE2-Ang（1-7）-Mas相关G蛋白偶联受体（Mas-related G-protein-coupled receptor,MasR）,研究表明,失血性休克后肾组织ACE/ACE2表达失衡,以肠淋巴液引流减少PHSML回流的干预措施可改善肾组织ACE/ACE2的失衡,说明ACE/ACE2失衡参与了PHSML介导的肾损伤,但其机制还待进一步研究。本实验以雄性C57小鼠为研究对象,利用RAS两条轴的工具药或ACE2-/-小鼠,调节ACE/ACE2平衡,探讨ACE/ACE2平衡在PHSML介导肾脏损伤中的作用。首先,将18只C57雄性小鼠随机均分为3组:Sham、Shock和Shock⁺Ligation组,Shock和Shock⁺Ligation组小鼠麻醉后打开腹腔,分离肠淋巴管,在肠淋巴管下穿线,不结扎,分离两侧股动脉,左侧股动脉插管后连接生物信号采集系统监测小鼠血压,右侧股动脉插管后连接推注机,用于放血和复苏,术后稳定30 min后开始放血,10 min内将血压降至40 mmHg,维持40±2 mmHg 1 h后,将抽出的血与林格液按体积比1:1混匀进行液体复苏,复苏完毕后Shock⁺Ligation组小鼠结扎肠淋巴管,Shan组和Shock组不结扎。同时取18只C57雄性小鼠,建立失血性休克模型,在液体复苏的同时,分别给予依那普利（Enalapril,10 mg/kg）、氯沙坦（Losartan,50 mg/kg）和Ang（1-7）(1×10^-7 mol/kg),复苏完毕后不结扎肠淋巴管,分别作为Shock⁺Enalapril、Shock⁺Losartan、Shock⁺Ang（1-7）组,每组6只;取C57雄性小鼠12只,复制失血性休克模型,在复苏的同时,分别给予MasR抑制剂A-779（0.1 mg/kg）和Ang II(1×10^-7 mol/kg),复苏完毕后结扎肠淋巴管,即为Shock⁺Ligation+A779组和Shock⁺Ligation+Ang II组,每组6只;取6只ACE2基因敲除（ACE2-/-）小鼠,复制失血性休克模型,复苏完毕后结扎肠淋巴管,即为Shock⁺Ligation+ACE-/-组。所有小鼠完成上述手术后,在液体复苏结束后4 h或相应时间点,留取小鼠肾脏和血浆。HE染色后,观察肾脏组织形态学变化;ELISA方法检测肾组织、血浆Ang II和Ang（1-7）含量;免疫组织化学染色方法观察肾组织ACE、ACE2、AT1R、Mas R的表达。结果发现,Sham组小鼠肾组织结构基本正常,Shock组小鼠肾脏出现了明显的组织损伤,肠淋巴管结扎以及Enalapril、Losartan、Ang（1-7）治疗减轻了休克小鼠的肾脏组织学损伤,ACE2-/-、Ang II、A-779加重了Shock⁺Ligation组小鼠肾脏组织学损伤程度。Shock组肾组织ACE、AT1R表达与Ang II含量较Sham组明显升高,Shock⁺Enalapril、Shock⁺Ang（1-7）、Shock⁺Losartan、Shock⁺Ligation组与Shock组相比,肾组织ACE、AT1R表达与Ang II含量明显降低;Shock⁺Ligation+Ang II组肾组织Ang II含量较Shock⁺Ligation组升高,Shock⁺Ligation+ACE2-/-与Shock⁺Ligation+A-779组肾组织中Ang II与Shock⁺Ligation组无统计学差异。Shock组血浆Ang II含量较Sham组显著升高;Shock⁺Enalapril和Shock⁺Ang（1-7）组血浆Ang II含量较Shock组明显减少;Shock⁺Ligation+Ang II组血浆Ang II水平较Shock⁺Ligation组明显升高。Shock组肾组织ACE2、MasR表达、Ang（1-7）水平较Sham组明显降低;Shock⁺Ang（1-7）和Shock⁺Ligation组肾组织ACE2、MasR表达与Ang（1-7）含量较Shock组明显升高,Shock⁺Enalapril、Shock⁺Losartan组肾组织ACE2、Mas R表达与Ang（1-7）水平与Shock无统计学差异;Shock⁺Ligation+ACE2-/-组肾脏ACE2表达、Ang（1-7）含量较Shock⁺Ligation组明显降低,Shock⁺Ligation+Ang II组肾组织MasR表达较Shock⁺Ligation组明显降低,Shock⁺Ligation+A-779组肾脏ACE2、Mas R表达与Ang（1-7）含量较Shock⁺Ligation组明显降低。Shock组血浆Ang（1-7）较Sham组明显降低,Shock⁺Enalapril组、Shock⁺Ang（1-7）组、Shock⁺Losartan组和Shock⁺Ligation组血浆Ang（1-7）含量较Shock组明显升高;Shock⁺Ligation+ACE2-/-、Shock⁺Ligation+Ang II和Shock⁺Ligation+A-779组血浆Ang（1-7）水平较Shock⁺Ligation组明显降低。上述研究结果表明,休克肠淋巴液介导肾损伤的机制与ACE-Ang II-AT1R高表达、ACE2-Ang（1-7）-Mas1R低表达有关,ACE/ACE2失衡参与了休克肠淋巴液介导的肾损伤;以RAS为切入点,可以调节失血性休克后的急性肾损伤。