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我国属世界最北端植胶区,橡胶树每年都受到各种非生物胁迫的影响,导致产量下滑。由于橡胶树种植周期长,常规育种效率低,因此借助近代分子育种技术筛选性状优良的橡胶树植株,是快速获得抗逆高产橡胶树品系的重要手段。WRKY转录因子普遍存在于各种高等植物中,并且调节着植物体内多种代谢途径。因此对橡胶树中WRKY转录因子的研究具有十分重要的意义。本研究从橡胶树中克隆出HbWRKY7b基因,并通过一系列实验分析其在抗逆方面的相关功能,主要研究结果如下:1.HbWRKY7b基因全长1173bp,其ORF全长792bp,共编码263个氨基酸,预测蛋白分子景为29.57kD,等电点(PI)为5.20,具有两个内含子片段,长度分别为149bp和 232bp。2.亚细胞定位实验结果表明HbWRKY7b是核定位蛋白。生物信息学分析结果表明,HbWRKY7b蛋白中含有一个WRKY结构域,属于第Ⅱe类WRKY转录因子家族成员,其蛋白序列中没有信号肽存在,不属于分泌蛋白;HbWRKY7b蛋白的亲水性较强,属于水溶性蛋白;没有跨膜结构,是非跨膜蛋白。功能预测显示HbWRKY7b蛋白在植物体内主要起转录调控的作用。3.使用荧光定量PCR技术分析HbWRKY7b在橡胶树各组织中的表达情况,结果显示:橡胶树各个组织中HbWRKY7b基因的表达量差异显著,其中在花内的表达量最高,树叶次之,树皮中HbWRKY7b的表达量仅高于胶乳,而在胶乳中HbWRKY7b基因几乎不表达。4.用两种低温方式处理橡胶树,定量结果显示两种模式下HbWRKY7b都能响应低温诱导上调表达量;但经过10℃低温驯化后HbWRKY7b的表达上调幅度低于未驯化实验组。除此之外,HbWRKY7b还能响应SA、H202、JA、ETH、ABA、干旱、渗透和高盐等非生物胁迫表达上调;结果显示HbWRKY7b基因可能作为正调节因子响应非生物胁迫以参与橡胶树抗逆途径。5.为了研究HbWRKY7b基因在抗逆途径中的功能,将HbWRKY7b克隆到植物表达载体pXCS-HAStrep和植物双基因共表达载体pXCS-Dgene-HAStrep中,并且获得了对应的拟南芥过表达植株。通过荧光定量PCR技术研究拟南芥过表达株系中抗逆相关基因在1℃低温处理、SA处理、JA和ABA处理下的表达模式,结果显示抗逆相关基因在转基因拟南芥中的上调幅度更为明显。使用表型分析研究拟南芥过表达株系在各种非生物胁迫下的耐受性,结果表明HbWRKY7b可能是植物中SA和JA信号通路的一个正调节因子,并且它的过表达可以增强植物体在寒冷、高盐、ABA、渗透和干旱等胁迫下的耐受能力。