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昆虫的蜕皮和变态受蜕皮激素和保幼激素的严格控制。蜕皮激素通过与蜕皮激素受体（EcR）和超气门蛋白（USP）形成的异源二聚体相互作用，起动包括转录因子表达在内的级联反应，从而引起昆虫的蜕皮和变态。双酰基肼类杀虫剂模拟昆虫蜕皮激素功能，与蜕皮激素受体蛋白互相作用且难于分离，阻碍相关基因的表达，影响多种酶的活性，从而持续诱导蜕皮反应使虫体早熟蜕皮而死亡。多种昆虫蜕皮激素受体和超气门蛋白基因的成功克隆为建立基于昆虫蜕皮激素受体的双酰基肼类杀虫剂高通量筛选技术奠定了基础。在细菌、酵母、昆虫细胞系中表达的EcR和USP蛋白，无论其粗提液，还是纯化蛋白，均可用于活性筛选。本研究克隆了斜纹夜蛾（鳞翅目）EcR和USP功能域基因，灰飞虱（同翅目）EcRcDNA全长，采用原核表达技术获取纯化蛋白，建立双酰基肼类杀虫剂（先导化合物）的初筛选模型。研究结果如下：1.利用RT-PCR技术分别获得了长度为1149bp的EcR目的片段和1062bp的USP的目的片段，目的片段包含EcR、USP结构域中的C域（DNA结合域DNA-binding domain，DBD）、D域（铰链域hinge region）、E域（配体结合域ligand-bind domain，LBD），经氨基酸多重序列比对证明目的片段与鳞翅目的其它昆虫有非常高的同源性。成功构建原核表达载体pEHISEGFPTEV-EcR|cde和pEHISEGFPTEV-USPcde，表达载体经诱导纯化获得EcR、USP功能域蛋白。目的蛋白以包涵体形式分泌，分子量约为67kD和64kD与理论大小相符。2.应用自主优化的RACE技术，克隆了灰飞虱的EcR基因全长cDNA序列（GenBank序列号为JQ031549），全长3403bp，编码阅读框1521bp，编码506个氨基酸；成为NCBI基因库中第一个同翅目害虫EcR全长序列，构建灰飞虱EcR基因原核表达载体pEHISEGFPTEV-EcR|cde-H。实验选取鳞翅目、鞘翅目、双翅目的7种昆虫的EcR基因的E域进行氨基酸比对，寻找多处氨基酸差异位点。3.采用放射性配基法，以斜纹夜蛾pEHISEGFPTEV-EcR|cde、pEHISEGFPTEV-USPcde原核表达载体诱导蛋白为基础，建立了一套双酰基肼类杀虫剂（先导化合物）的简易初筛选模型。