实验目的：单克隆抗体介导的MR免疫成像不但有助于微小癌灶的检出，而且有可能对肿瘤的组织类型作出术前诊断。但由于肿瘤局部选择性浓集的Gd³⁺离子浓度较低，产生的信号较弱，成为MR免疫成像发展的障碍。生物素-亲和素预定位系统三步法具有信号放大作用，能够大幅度提高肿瘤/非肿瘤的放射性核素的比值，在放射免疫显像动物实验和临床应用中取得了良好的效果。MR免疫成像的原理基本同放射免疫成像，只是所用的示踪元素不同。为了提高瘤靶局部Gd³⁺离子的浓度，增强肉眼可辨的信号强度，本实验设想应用生物素-亲和素预定位技术，对皮下接种人大肠癌的裸鼠模型进行实验研究，探索抗体生物素化的条件、预定位增强方法和增强特点，以达到提高MR免疫成像敏感性的目的。 材料和方法：1、6-8周龄的BALB/C裸鼠20只，在右前肢背部和部分右臀部皮下注射入大肠癌LoVo细胞，制作肿瘤模型。2、将抗CEA单克隆抗体CL_-3和生物素酯（NHS-LS-Biotin/DMSO），按1∶30-50摩尔比，在碱性条件下活化。3、GdCl₃和DTPA-B反应后，用G-10凝胶层析法去除游离的Gd³⁺离子。4、单克隆抗体CL_-3与cDTPA偶联，并用超速离心法除去游离的DTPA，将CL_-3-DTPA偶合物标记Gd³⁺。5、将动物分为三组：预定位组、抗体对照组和Gd-DTPA组。预定位组，在第一天尾静脉注射生物素化单抗（McAb-B），24小时后腹腔注射Av和SA，48小时尾静脉注射Gd-DTPA-B。抗体对照组和Gd-DTPA组则在第三天，即预定位组的首次注射后48小时，尾静脉分别注射McAb-Gd-DTPA和Gd-DTPA。所有动物均进行平扫，注射Gd造影剂增强后20分钟、2小时、8小时及24小时5次扫描，测定各时间点信号强度及背景噪声标准差。 结果：1、CL_-3单克隆抗体在生物素化后，每个抗体可结合11-23个生物素分子，结合12个时，抗体活性高达95％。2、应用G-10凝胶层析法可去除Gd-DTPA-B中所含的游离Gd³⁺离子。3、预定位法对肿瘤有特异性增强作用，注射Gd-DTPA-B 2小时后，只有肿瘤组织有明显强化作 用，而肌肉组织则无强化作用。在注射 Gd－DTPAB 20分钟，肿瘤信号 强度明显升高，以后呈缀慢下降趋势，在24小时后仍可见到有差别。4、 预定位法有信号放大作用，其特异性信号升高幅度（强化率）约为43％， McAbodoTPA对肿瘤亦有特异性增强作用，但其增强幅度较低，在24 ’J＼时时其信号升高门．9％。据此预定位法强化率为抗体直接标记法的 2．4 倍。5、与直接标记单抗相比，预定位法提高了增强后对比度噪声比，增 强后各时间分别是平扫的5．7、4．2、4．8、4．3倍。而抗体对照组在24 ，J’ 时最大时仅为平扫的2．4倍。 结论：预定位法对荷人大肠癌裸鼠肿瘤有特异性增强作用和信号放 大作用，对提高瘤靶Gd3”的选择性浓集，具有显著性促进作用；优于传 统的抗体直接标记法。可为Gd标记的单克隆抗体磁共振靶向诊断提供 新途径。