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肥胖是机体能量摄入大于能量消耗,造成能量代谢失衡,过多的能量在体内转化成甘油三酯积聚在腹腔脂肪组织和皮下脂肪组织的一种代谢紊乱的疾病。肥胖对人体几乎所有的生理功能都有不利的影响,并对公共卫生安全造成严重威胁。如何有效地预防和治疗肥胖已成为当今人们共同面临和亟待解决的严峻问题。目前已研发出多种化学合成减肥药用于治疗肥胖,但这些化学合成药都有难以控制的副作用（失眠、震颤、血压上升和心跳加快、头痛、心悸、胃肠不适、脂肪便）而不被患者接受。因此研发天然、安全和有效的减肥产品已成为该领域的研究热点。金花茶（Camellia nitidissima Chi）是山茶科山茶属的常绿灌木至小乔木,已被批准为药食同源食品。金花茶花含有多种潜在抗肥胖作用的天然黄酮活性成分,但目前尚未见关于金花茶花黄酮类化合物（CNFC）抗肥胖作用和机制的系统和全面研究。本课题以防城港普通金花茶花为主要研究对象,通过提取纯化得到CNFC,并对其主要组分进行表征,采用体外和体内实验研究CNFC抗食源性肥胖的作用和机制,主要研究内容和结论如下:（1）CNFC主要成分结构表征以金花茶花为原料,采用有机溶剂提取和大孔树脂纯化制得CNFC,并用液相色谱分离收集CNFC主要成分,用时间飞行质谱仪表征收集物。结果表明,CNFC的主要成分为:表儿茶素或儿茶素、原花青素二聚体、原花青素三聚体、原花青素四聚体、原花青素五聚体、芹菜素-6,8-二-C-葡糖苷、芹菜素-6-C-戊糖-8-C-己糖苷、槲皮素-3-O-[α-L-鼠李糖-（1→2）-β-D-葡萄糖基]-5-O-β-D-葡萄糖苷、芦丁、芦丁同分异构体、异槲皮素或异槲皮素同分异构体、3’,5’-二-C-β-D-葡萄糖-根皮素、山奈酚3-O-半乳糖苷。其中原花青素四聚体、原花青素五聚体、芹菜素-6,8-二-C-葡糖苷和3’,5’-二-C-β-D-葡萄糖-根皮素均在金花茶花中被首次发现。（2）CNFC体外抑制消化酶活性以α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶、胰脂肪酶和胆固醇酯酶为研究对象,采用体外抑制酶活的方法,研究CNFC对消化酶活性的抑制作用及机制。结果表明,CNFC不仅与消化酶（α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶）相互作用,还与底物（淀粉）结合影响淀粉消化。CNFC抑制α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶、胰脂肪酶、胆固醇酯酶和抑制胆固醇胶束溶解度的IC50分别为300μg/m L、45μg/m L、320μg/m L、200μg/m L和600μg/m L,抑制类型分别为竞争型抑制、混合型抑制、非竞争性抑制和非竞争性抑制。荧光光谱和圆二色光谱结果表明CNFC通过改变了α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶、胰脂肪酶和胆固醇酯酶的微环境和空间结构,降低酶的催化活性。（3）CNFC对高脂饮食诱导Sprague Dawley（SD）大鼠肥胖的调节作用以高脂饲料诱导食源性肥胖大鼠为模型,研究CNFC的抗肥胖作用及其对肥胖并发症等的影响。结果表明,CNFC抗肥胖作用主要通过以下四种方式:首先,通过显著（p<0.05）上调胰高血糖素肽-1的分泌,降低食欲,减少食物的摄入;其次,通过抑制体内消化酶的活性,降低食物的吸收,促进粪便中能量物质（总甘油三酯和总胆固醇）的排出;再次,通过抑制前体脂肪细胞分化,改变能量物质储存形式;最后,通过显著上调脂肪水解酶（p<0.05）的表达和脂联素（p<0.05）的分泌,促进脂肪分解和脂肪酸氧化,达到抑制体重增加的效果。CNFC显著（p<0.05）降低高脂饲料诱导肥胖大鼠血清和肝脏中总甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、脂质过氧化物丙二醛的含量和血清中碱性磷酸酶、谷丙转氨酶和谷草转氨酶的含量;显著（p<0.05）提高过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化酶、总超氧化物歧化酶和血清中高密度脂蛋白胆固醇的含量,从而修复了机体血脂和肝脂异常,改善了机体内氧化应激环境和肝脏炎症,降低了脂质过氧化物和氧化应激造成的损伤;降低糖耐曲线下面积和胰岛素抵抗指数,改善了葡萄糖耐受不良性和胰岛素敏感性,从而改善了肥胖并发症。（4）CNFC调节肠道菌群的作用以高脂饲料诱导肥胖大鼠的粪便为研究对象,采用16s r RNA高通量测序技术,研究CNFC对肠道菌群的影响。结果表明,CNFC通过增加肠道菌群α多样性和恢复肠道菌群组成,从而修复高脂饮食诱导肥胖大鼠肠道菌群失调。在门类水平上,CNFC降低厚壁菌门（Firmicutes）的丰度,增加拟杆菌门（Bacteroidetes）和疣微菌门（Verrucomicrobia）的丰度;在科类水平上,CNFC增加乳酸杆菌科（Lactobacillaceae）、拟杆菌科（Bacteroidaceae）、阿克曼菌科（Akkermansiaceae）的丰度;降低毛螺菌科（Lachnospiraceae）丰度;斯皮尔曼相关分析表明:OTU564、OTU606、OTU489、OTU453,门:疣微菌门（Verrucomicrobia）、变形杆菌门（Proteobacteria）和拟杆菌门（Bacteroidetes）,科:阿克曼科（Akkermansiaceae）、肠杆菌科（Enterobacteriaceae）和拟杆菌门（Bacteroidetes）与宿主肥胖表型和大部分血清指标呈负相关;OTU107、OTU91、OTU433,门:厚壁菌门（Firmicutes）;科:毛螺旋菌科（Lachnospiracea）和疣微菌科（Ruminococcaceae）与宿主肥胖表型和大部分血清指标呈正相关。（5）CNFC调节白色脂肪组织和3T3-L1前体脂肪细胞脂肪积累和分化以高脂饮食诱导肥胖大鼠的白色脂肪组织和3T3-L1前体脂肪细胞为研究对象,采用实时荧光定量PCR和蛋白印迹技术（Western blot）检测脂肪代谢相关基因和蛋白的表达,研究CNFC体外和体内抗肥胖的机制。结果表明,CNFC能有效抑制3T3-L1前体脂肪细胞的脂肪积累,100μg/m L CNFC处理10天后,3T3-L1细胞内总甘油三酯水平显著（p<0.01）下降（下降了80±4.1%）。CNFC抑制脂肪积累主要在3T3-L1前体脂肪细胞分化的早期（2天）和晚期（6天）。CNFC激活AMPK信号通路,调节3T3-L1前体脂肪细胞分化和白色脂肪组织脂肪代谢。CNFC通过显著（p<0.05）下调关键转录因子CCAAT/增强子结合蛋白α（C/EBPα）和过氧化物酶体增殖剂激活受体γ（PPARγ）表达,抑制脂肪细胞形成;同时,通过显著（p<0.05）下调转录因子胆固醇调节元件结合蛋白-1c（SREBP-1C）表达,进一步下调脂肪酸合成酶（FAS）和乙酰辅酶A羧化酶（ACC）表达,抑制脂肪合成和延缓细胞成熟;还能通过显著（p<0.05）上调脂肪水解酶甘油三酯脂酶（ATGL）和脂肪酸β氧化分解中肉碱棕榈酰转移酶-I（CPT-1）载体表达,促进脂肪分解和脂肪酸氧化,但CNFC不能上调脂肪分解酶激素敏感脂肪酶（HSL）表达。（6）CNFC调节肝脏组织中脂肪代谢为了研究CNFC对肝脏脂肪积累的影响,采用实时荧光定量PCR和蛋白印迹技术（Western blot）检测肥胖大鼠肝脏中脂肪代谢相关基因和蛋白的表达。结果表明,CNFC通过显著（p<0.05）下调转录因子C/EBPβ、C/EBPδ、C/EBPα和PPARγ的表达,抑制肝脏组织中脂肪细胞形成;同时,CNFC通过显著（p<0.05）下调转录因子SREBP-1C、脂肪合成酶ACC的表达,抑制肝脏脂肪积累;CNFC还能显著（p<0.05）上调脂肪水解酶ATGL、HSL和CPT-1的表达,促进肝脏组织中脂肪分解、脂肪酸氧化和上调肝脏组织解偶联蛋白1（UCP1）和受转录元件辅激活蛋白（PGC-1a）的表达,提升棕化。