【摘 要】
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柑橘是我国南方的重要经济作物,而逆境胁迫特别是干旱制约着柑橘的生产。脱落酸(ABA)在植物应对逆境胁迫中起着积极的作用。通过改变ABA生物合成过程中关键酶基因的表达,从而
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柑橘是我国南方的重要经济作物,而逆境胁迫特别是干旱制约着柑橘的生产。脱落酸(ABA)在植物应对逆境胁迫中起着积极的作用。通过改变ABA生物合成过程中关键酶基因的表达,从而提高植物内源ABA水平是增强植物抗逆性的一个重要手段。9-11顺式-环氧类胡萝卜素双加氧酶(NCED)是一个ABA合成中起关键作用的酶,影响着植物体内ABA的积累。本研究在已经获得转CrNCED1基因烟草的基础上,对转基因烟草和野生型烟草在逆境胁迫下的抗性进行分析,研究CrNCED1基因在植物生长和应对逆境胁迫中的功能,得到如下结果：1.对转CrNCED1基因烟草T2代进行Kan抗性筛选和PCR鉴定,得到了8个纯合的转基因株系,分别是C5-3、C5-5、C5-6、C7-1、C7-4、C7-7、C9-4、C9-5。对其中6个转基因株系和野生型的CrNCED1基因表达量进行检测,结果表明CrNCED1基因在转基因烟草中都有不同程度的表达,而对照野生型中没有表达。选取CrNCED1基因表达量较高的3个转基因株系C5-6、C7-4和C9-4进行CrNCED1基因的功能验证。2.在幼苗期,转CrNCED1基因烟草根生长比野生型慢。对纯合株系C5-6、C7-4和C9-4进行ABA敏感性试验,结果表明在含ABA的培养基上,转基因烟草根生长比野生型快,ABA对转基因烟草根的生长抑制作用较小。3.对转CrNCED1基因烟草和非转基因烟草进行脱水处理、干旱胁迫处理、叶圆片的盐和过氧化氢处理,结果显示在胁迫处理下转基因烟草具有更强的抗逆性。在逆境胁迫下,转基因烟草的水分保持能力较强；膜系统较稳定,膜质受到的伤害较小；受到的活性氧伤害小；叶绿素保护能力较强。
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