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口蹄疫严重影响着我国畜牧业发展,危害严重,给各国带来了惨重的经济损失。目前防控口蹄疫的有效方法是接种疫苗,动物免疫疫苗后体内产生的抗体高低水平直接反应疫苗对动物的保护效力。通过血清学方法检测免疫后动物血清中抗体的高低,可以直接评价疫苗的质量水平,同时为管理者了解动物免疫后的免疫动态提供了一个合理的参考。本研究采用pET-28a-HSP(+)原核表达载体在基因工程菌BL21 (DE3)中成功表达了O型口蹄疫VP1截短蛋白第131～213位多肽,SDS-PAGE电泳图结果表明在30kDa处有一条带,与目的蛋白大小一致,且主要以包涵体的形式存在。对表达得到的包涵体蛋白用8M尿素处理后,将其作为包被抗原成功构建了间接ELISA方法,结果表明,建立的HSP-131-ELISA方法具有良好的敏感性和特异性。利用HSP-131-ELISA方法检测544份临床血清及235份试验猪跟踪血清,并与意大利IZSLER,韩国金诺MEDIAN进口商业化试剂盒对比结果的符合率,以此来评价HSP-131-ELISA方法的可靠性。临床上血清检测结果与MEDIAN试剂盒的阳性符合率为91.83%,阴性符合率为82.36%,总符合率为89.49%；试验猪跟踪血清检测结果与IZSLER进口试剂盒和MEDIAN进口试剂盒检测结果表明,彼此之间检测的抗体消长规律相符合,并且抗体的阳性率及平均抗体水平呈明显的先下降后上升的趋势,并且在经过第3次加强免疫18天后抗体水平达到峰值,与试剂盒的检测结果相符合。然而与试剂盒相比,HSP-131-ELISA方法在检测免疫前即母源抗体和一免18天后的血清中抗体,结果均比试剂盒的阳性率高,说明HSP-131-ELISA方法可能较试剂盒的敏感性高,也有可能是因为非特异性的原因；在检测二免18天后的血清中抗体,结果表明阳性率较试剂盒低,此结果从某种程度上给临床上的免疫程序提供了一个参考及指导作用。综上所述本方法具有较高的敏感性、特异性及可重复性,给口蹄疫检测试剂盒的研发提供了参考。