【摘 要】
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真菌性角膜炎是严重的致盲性眼病之一，近年来发病率呈逐年上升趋势。早期确诊是有效降低致盲及致残率，制定合适治疗方案的关键。目前临床上常用的确诊方法是刮片镜检和真菌培养
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真菌性角膜炎是严重的致盲性眼病之一，近年来发病率呈逐年上升趋势。早期确诊是有效降低致盲及致残率，制定合适治疗方案的关键。目前临床上常用的确诊方法是刮片镜检和真菌培养法，但是不能进行菌种鉴定和需时较长是它们的不足之处。 我们通过探索构建了一个多重PCR体系，可以对真菌性角膜炎进行快速诊断同时对菌属进行鉴定。并通过对比传统的诊断方法，评价PCR体系诊断真菌性角膜炎的有效性。 目的：应用多重PCR快速诊断真菌性角膜炎并同时鉴定菌属。 方法：(1)通过设计属特异性引物，建立一个多重PCR体系对真菌性角膜炎常见的九种致病菌腐皮镰孢菌，禾谷镰孢菌，木贼镰孢菌，串珠镰孢菌，烟曲霉菌，黄曲霉菌，黑曲霉菌，新月弯孢菌，牵连青霉菌的DNA进行检测，并观察该体系对人类基因组及其他眼部常见致病微生物DNA的检测结果。(2)采用腐皮镰孢菌标准菌株提取的质粒DNA稀释液梯度对多重PCR体系进行优化，选择合适的各组分用量和循环参数。(3)紫外分光光度仪测定质粒DNA的质量浓度，根据测定值将质粒DNA进行系列稀释，检测反应体系的灵敏度。(4)42例临床培养真菌和86例临床角膜刮片标本用多重PCR体系鉴定，以验证本
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