油菜上链格孢菌的分离、鉴定、致病力比较及药剂筛选

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2012年5月湖南省醴陵市油菜品种丰油730F1角果上发生严重黑霉,发病面积在90%以上。为查明病害的原因及防治对策,特开展了本项研究。研究的创新点及研究结果如下:(1)角果黑霉病为油菜黑斑病的一种特殊症状。从醴陵发病的油菜角果和种子上分离到数个孢子形态特征一致的菌株,经镜检鉴定这些菌株为链格孢菌(Alternariasp.)。取其中一个菌株FY730F-01做为代表菌株,制成孢子浓度为1×106个/mL的孢子悬浮液进行田间喷雾接种可使油菜角果发病,回接角果进行再分离,仍得到原分离菌,经柯赫氏法则验证分离菌即为该病害的致病菌。通过病菌镜检和rDNA-ITS序列分析,将该致病菌鉴定为芸薹链格孢{A. brassicae)。(2)湖南省36个油菜栽培品种有35个种子带菌。除禾盛油868,其余35个品种种子均分离到链格孢,以华湘油12号分离率最高(66.00%)。经rDNA-ITS序列分析,分离到的菌分属芸薹生链格孢(A. brassicicola)和芸薹链格孢(A. brassicae)两个种,未检测到萝卜链格孢(A. raphani)。 A. brassicicola的分离频率要高于A. brassicae。华湘油12号种子上分离到的菌全为芸薹生链格孢,而芸薹链格孢以常油杂61为最高(15.00%)。(《中国油料作物学报》已接收)。(3) A. brassicicola致病力明显强于A. brassicae。通过孢子悬浮液离体接种油菜叶片检测了14个菌株的致病力,结果显示A. brassicicola菌株YY817-15和YY817-14致病力较强,产生的病斑平均直径分别为25.00mm和21.13mm; A. brassicae菌株致病力较弱,病斑平均直径分别为8.88mm和9.63mm。(4)首次在芸薹生链格孢菌上检测到病毒。用纤维素CF-11法对14个链格孢菌株进行了dsRNA提取,通过DNaseI酶和S1Nuclease肖化处理,琼脂糖电泳检测发现菌株YY817-14和YY817-15中含有dsRNA。(5)10%苯醚甲环唑抑菌作用最佳。检测了11种杀菌剂对菌株FY730F-01(A.brassicae)和YY817-15(A. brassicicola)的抑菌作用。供试杀菌剂对FY730F-01的抑菌作用,以10%苯醚甲环唑和40%氟硅唑的抑菌效果最好,EC5o分别为0.4802mg/L和0.9421mmg/L;其次是25%丙环唑和40%咪鲜胺,EC50分别为3.4025mg/L和3.9174mg/L。供试杀菌剂对YY817-15的抑菌作用,以40%咪鲜胺和10%苯醚甲环唑的抑菌效果最好,EC5o分别为0.2052mg/L和0.2248mg/L;其次是40%氟硅唑和25%丙环唑,EC5o分别为0.8723mg/L和0.9413mg/L。75%百菌清和50%甲基硫菌灵对两个菌株的抑菌效果都较差。本研究为油菜黑斑病的化学防治提供了理论依据。
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