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叶酸(FA)是一种B族维生素,对细胞分裂和个体生长有重要的作用,孕妇补充FA可以有效预防婴儿先天缺陷。FA对光、热、湿、氧等因素不稳定,在制剂加工及产品保存过程中容易发生降解。为了改善FA的稳定性,本研究通过β-环糊精(β-CD)对其进行包合,制备FA-β-CD包合物。主要研究内容及结果如下:
(1)通过MOPAC分子模拟和紫外光谱法(UV)探讨在水相中β-CD对FA包合的可行性,在此基础上,采用紫外分光光度法测定β-CD与FA的包合比和包合物稳定常数。结果表明:在水相中,FA分子两端的喋啶基团和谷氨酸基团分别进入β-CD空腔,自发形成摩尔比为1:2(FA:β-CD)的稳定包合物,333K时包合物的稳定常数K为4.615×105。
(2)分别采用共沉淀法、研磨法制备FA-β-CD包合物,并通过傅里叶变换红外光谱法(FT-IR)、X-射线粉末衍射法(XRD)、热重-差热分析法(TG-DTA)对包合物进行表征。结果表明:共沉淀法可以制备得到稳定的FA-β-CD包合物,而研磨法制备的FA-β-CD体系并未形成真正的包合物。
(3)采用Box-Benhnken实验设计考察包合温度、包合时间、β-CD和FA的质量比对包合物收率的影响,通过响应面法分析优化包合物的制备工艺。采用共沉淀法制备包合物的较佳工艺条件为:包合温度为82.4℃,包合时间为3.5h,β-CD与FA的质量比为5.2。在上述条件下,包合物的收率为79.5%,通过响应面模型计算得到包合物的收率为78.1%。
(4)采用经典恒温加速法研究温度对游离FA、包合物中FA的热稳定性的影响,通过高效液相色谱法(HPLC)测定FA含量。结果表明:FA和FA-β-CD的热降解反应均属于一级反应,在室温下,包合物中FA有效期是游离FA有效期的3.6倍。