梅花鹿(Cervus nippon Temminck)位居动物药之首，鹿茸以其神奇的药用价值和滋补功能在中药材领域发挥着不可代替的作用。鹿茸中成分至今不清，严重制约了梅花鹿产业的发展。另外，我国鹿茸质量标准体系缺失，致使鹿产品的国际竞争力逐年下降。为此，如何利用现代生物技术从分子水平分析鹿茸成分，建立鹿茸质量评价体系，已经成为梅花鹿产业发展急需解决的问题。本实验筛选出鹿茸全蛋白最佳提取方法，建立了梅花鹿鹿茸双向电泳体系；利用蛋白质组学方法分析了二杠梅花鹿茸蛋白质组成，为鹿茸系列产品的深度开发提供了理论依据。首先，建立梅花鹿鹿茸双向电泳体系，筛选最适鹿茸全蛋白提取方法和电泳参数，以便得到清晰的蛋白图谱。结果表明裂解液法得到的蛋白样品浓度较高，且样品的双向电泳图谱蛋白点数量多、圆滑、分辨率高，图谱横竖纹少。其次，利用PDQuest软件检测图谱上的蛋白点，切取目的蛋白后利用MALDI-TOF/TOF质谱技术鉴定并NCBI数据库搜索比对，采用打分方式确定蛋白鉴定是否成功。对鉴定成功的蛋白质进行功能分析，寻找与鹿茸生长有关的蛋白和具有保健作用的药效蛋白。在蛋白图谱上共检测到460个蛋白点，鉴定成功177种单一蛋白。其中结构蛋白31种，具有酶活性的蛋白65种，抑制剂和激活剂5种，信号通道蛋白和分泌蛋白30种，免疫蛋白3种，与蛋白折叠有关的蛋白13种，与复制转录及翻译有关的蛋白14种，血液蛋白10种，与肿瘤发生有关的蛋白6种。最后，筛选得到24种与鹿茸生长发育和保健作用有关的蛋白。推测中心体肌动蛋白、波形蛋白、ATP合成酶、α-烯醇化酶、丙酮酸激酶、线粒体柠檬酸合成酶、苹果酸脱氢酶、延胡索酸水解酶、乙醇脱氢酶、肌红蛋白、血红蛋白、真核生物延伸因子、前体mRNA加工因子、tRNA合成酶等14种蛋白与鹿茸的生长发育有关；热应激蛋白与鹿茸促进组织伤口愈合有关；肌腱蛋白与促进神经再生有关；钙网蛋白、胶原蛋白、钙调素结合蛋白、骨连接蛋白、内质网钙结合蛋白、FK506结合蛋白等6种蛋白与鹿茸的骨化有关；含锰超氧化物歧化酶、过氧化还原酶与鹿茸的抗衰老有关。