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本文采用三种分子生物学方法(ERIC-PCR-AGE、ERIC-PCR-DGGE和V3-PCR-DGGE)联合活菌计数法分析肉鸡呼吸道菌群结构的多样性,枯草芽孢杆菌Pab02喷雾剂对肉鸡生长性能和呼吸道菌群的影响以及Pab02预防和治疗金黄色葡萄球菌感染的效果,结果如下:1.选取48只7日龄健康肉公鸡,随机分为2组,每组24只,CK组为对照组,P组为喷雾芽孢杆菌Pab02组。P组动物房内每日8时喷雾1ml/m3的Pab02制剂(108cfu/ml),28日龄时对肉鸡称重。结果,与CK组相比,P组净增重提高了9.40g,平均日增重提高了2.68g,全期耗料降低125g,平均日耗料降低5.59g,料肉比降低0.02,但差异性均不显著(P>0.05)。结果表明通过喷雾枯草芽孢杆菌Pab02对肉鸡的采食量、日增重、料肉比等生长性能有所提高,但无明显作用。2.采用活菌计数法和三种分子生物学分析法对28和49日龄肉鸡呼吸道细菌结构及多样性进行检测,结果,49日龄时呼吸道细菌总数略高于28日龄时;喉部的细菌总数比气管高一个数量级,喉部细菌总数为106cfu/g,气管细菌总数为105cfu/g;喷雾Pab02后,喉部细菌数显著增高(P<0.05),气管细菌数量略有增多(P>0.05);49日龄时呼吸道各段的条带数量显著多于28日龄(P<0.05),两个日龄段之间呼吸道各段菌群相似性为59%-84%;喉部的条带数量显著多于气管(P<0.05),喉与气管的菌群相似性为60%-84%。说明,肉鸡在49日龄时,呼吸道菌群多样性均显著高于28日龄时,,但两日龄之间呼吸道菌群相似性仍然很高;喉部的菌群多样性显著高于气管,但两者之间的菌群相似性仍然很高。喷雾Pab02后,喉部的条带数显著增多(P<0.05),相似性提高了6-16个百分点;气管的条带数量变化不显著(P>0.05),相似性提高了11-16个百分点。说明喷雾Pab02能增加呼吸道细菌数量和多样性,并能提高菌群的相似性,但是对不同部位的调节能力不同,对肉鸡喉部的调节作用较大,对气管的调节作用较弱。3.利用金色葡萄球菌G1分别通过滴鼻感染两组肉鸡,然后采用活菌计数和分子生物学方法检测菌群结构,结果,在感染G1前和后均喷雾Pab02不能显著改变喉部的细菌总数(P>0.05),但能显著减少气管中的细菌总数和整个呼吸道(喉部和气管)中的葡萄球菌数(P<0.05);在感染前喷雾Pab02或在感染后喷雾Pab02均不能显著改变呼吸道中的细菌总数(P>0.05),但能显著减少呼吸道中的葡萄球菌数(P<0.05);在感染G1前和后均喷雾Pab02或者仅在感染G1前喷雾Pab02能够恢复呼吸道菌群多样性和相似性,而在感染G1后再喷雾Pab02不能恢复呼吸道菌群多样性和相似性。4.通过组织学方法观察喷雾枯草芽孢杆菌Pab02以及滴鼻感染金色葡萄球菌G1后对肉鸡肺组织的影响。结果,Pab02喷雾组肺泡正常,未见破裂和融合,未见肺间质增生,未见炎性渗出物,但淋巴小结增多;感染G1后,可见肺泡破裂融合,出血严重,炎性细胞大量增多,有炎性渗出物和严重化生灶;在感染前后均喷雾Pab02能使肺脏中淋巴小结增多,而且未见肺损伤;在感染前喷雾Pab02,能使肺内淋巴小结增多,炎性细胞增多,可见肺泡扩张现象;感染后喷雾Pab02,肺脏中可见肺泡破裂融合,炎性细胞大量增多,可见炎性渗出物和轻微化生灶。结果表明Pab02喷雾剂对肺组织不产生损伤,具有刺激肺脏免疫功能的作用;对呼吸系统的感染有预防和治疗作用,但是预防作用大于治疗作用。