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【背景】我国是胃癌高发区,在我国胃癌的发病率和死亡率在所有肿瘤中均居第二位,数据显示新发肿瘤患者中有74%发生在亚洲,其中约半数发生在我国。胃癌的死亡率一直居高不下,其中胃癌转移是导致胃癌患者死亡和治疗失败的主要原因,而转移的分子机制尚不清楚。本实验室前期通过研究对两株转移能力不同的胃癌转移细胞系进行microRNA芯片分析,发现多个可抑制胃癌转移的miRNA,其中以let-7f抑制胃癌转移作用最为显著。【目的】研究let-7f-5p与胃癌转移之间的关系;筛选并验证let-7f-5p的下游靶基因;探究let-7f-5p靶基因与胃癌转移的关系。【方法】1、通过qRT-PCR的方法检验let-7f-5p在胃癌细胞中的表达,转染let-7f-5p的类似物及抑制物通过transwell实验检验let-7f-5p对胃癌转移的影响;2,通过生物信息学预测的方法预测let-7f-5p的靶基因,并运用qRT-PCR、双荧光素酶报告基因实验及Western blot实验验证let-7f-5p与其靶基因的调控关系;3、通过免疫组化和实时荧光定量PCR实验验证let-7f-5p靶基因在胃癌及癌旁组织之间的表达,通过转染靶基因的小干扰RNA对靶基因进行功能研究,通过Western blot检验干扰let-7f-5p靶基因对其他重要分子通路蛋白水平的影响。【结果】一,let-7f-5p与胃癌转移成负相关关系。我们在胃癌高低转移细胞系MKN28M、MKN28NM中验证了let-7f-5p在胃癌高转移细胞系中低表达,在胃癌低转移细胞系中高表达;在高转移细胞系MKN28M中转染let-7f-5p的类似物使其上调,在低转移细胞系MKN28NM细胞系中转染let-7f-5p的抑制物使let-7f-5p下调,通过tanswell迁移和侵袭实验发现let-7f-5p与胃癌细胞的迁移能力和侵袭能力呈负相关关系。二,FNDC3B和MMP11为let-7f-5p的靶基因,且let-7f-5p与FNDC3B mRNA的3’-UTR直接结合。我们通过生物信息学预测的方法使用4个生物信息学预测软件(CLIP-Seq,miRanda,Pic Tar和Target Scan)预测let-7f-5p的靶基因,发现FNDC3B与MMP11的3’-UTR上有与let-7f-5p结合位点,而且通过文献回顾发现FNDC3B与MMP11与转移相关;我们通过双荧光素酶报告基因实验和Western blot验证了let-7f-5p通过与FNDC3B mRNA的3’-UTR直接结合从而下调FNDC3B,通过Western blot验证了MMP11可能为let-7f-5p的下游靶基因。三,FNDC3B可抑制胃癌的粘附、转移,且其可影响EMT分子和MMP家族的表达。我们使用小干扰RNA技术使FNDC3B下调,通过细胞粘附实验和transwell实验发现下调FNDC3B的表达可抑制胃癌细胞的粘附、迁移和侵袭能力,通过western blot实验发现下调FNDC3B可抑制MMP分子的表达,同時下调FNDC3B可上调viminten的表达。【结论】1,let-7f-5p的表达与胃癌转移负相关。2,FNDC3B和MMP11是let-7f-5p的靶基因,而且let-7f-5p通过与FNDC3B的3’-UTR区直接结合从而下调FNDC3B的表达。3,下调FNDC3B的表达可抑制胃癌的粘附、迁移和侵袭能力,且下调FNDC3B可抑制MMP9和MMP11的表达,同时下调FNDC3B可促进viminten的表达。