麻疯树(Jatropha curcas L.)脂质合成的酶基因克隆及功能研究

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麻疯树(Jatropha curcoas L.)是一种广泛生长在亚洲、非洲和拉丁美洲等国家和地区的含油灌木植物。这种植物有多种用途,如防护土壤侵蚀、改良土壤或作为商业经济作物种植。我们的研究显示,其种子TAG含量达62%,其中亚油酸含量达到总脂肪酸的47%,尽管目前,麻疯树油被认为食用是有毒的,但这并不妨碍其成为一个优秀的亚油酸基因供体植物。用麻疯树油脂加工而成的生物柴油,在同类产品中是相当优秀的。 针对麻疯树含有与脂质合成相关的优秀基因,这吸引我们来克隆这些基因并鉴定他们的功能及表达活性。本文用运兼并性引物策略,成功的克隆到了与麻疯树不饱和脂肪酸合成相关的3个脱饱和酶基因和1个与贮存油脂TAG合成的DAGAT基因的部分序列,经生物信息学分析确认了序列片段的正确性后,成功地运用了先进的RACE技术,获得了这几个基因的完整编码筐。他们分别被命名为:Jcω6,一个导致麻疯树亚油酸合成的基因;Jcω3,一个导致麻疯树膜脂亚麻酸合成的基因;Jcω8,一个导致麻疯树膜脂,植物鞘磷脂合成的酶基因;Jcdagat,一个导致脂质以TAG的形式储存到种子中的酶基因。同时也克隆了编码麻疯树的18S rRNA的基因,这为我们的所有分子生物学实验提供了对照和控制实验的工具。Jcω6的编码筐大小为1152bp,编码一个383个氨基酸的酶,其推测的分子量大小为44.5KDm; Jcω3的编码筐大小为1341bp,编码一个446个氨基酸的酶,其推测的分子量大小为51KDm Jcd8的编码筐大小为1344bp,编码一个447个氨基酸的酶,其推测的分子量大小为51KDa;Jcdagat的编码
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