甘薯sporamin蛋白抑制脂肪细胞生成及降血脂作用研究

来源 :中国农业科学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:duanh
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甘薯是广泛栽培于热带、亚热带地区的一种杂粮作物,可作粮食、饲料和工业原料。甘薯可溶性蛋白的必需氨基酸含量高于其它大多数植物蛋白,氨基酸组成模式符合WHO/FAO的推荐标准,生物价比较高,因此具有较高的营养价值,可与牛奶、肉类相媲美。Sporamin是甘薯中主要的可溶性蛋白,占其总量的60%-80%,它与马铃薯patatin蛋白、薯蓣dioscorin蛋白等同属变态根茎器官中的特异贮藏蛋白。此外,sporamin是一种胰蛋白酶抑制剂,具有Kunitz型胰蛋白酶抑制剂活性,在转基因抗虫植物中有着潜在的应用前景。同时,sporamin还具有抗坏血酸酶和单脱氢抗坏血酸还原酶活性,其作用机制可能是由于sporamin蛋白分子间的巯基能还原自由基所致。目前关于sporamin蛋白作为甘薯块茎中的一类特异性贮藏蛋白的研究主要集中于各种转基因作物抗病育种方面,而关于其生物活性报道不多,且未见有关于甘薯sporamin蛋白在预防和治疗肥胖作用效果上的研究。因此,本试验首先采用硫酸铵沉淀、离子交换、凝胶过滤层析的方法对“55-2”甘薯中的sporamin蛋白进行分离纯化,经纯化可得到高纯度的spormain A和sporamin B.然后,利用sporamin蛋白研究其对3T3-L1前脂肪细胞增殖与分化的影响。以黄连素为对照,用不同浓度sporamin(0、0.025、0.125、0.250、0.500、1.000mg·mL-1)处理3T3-L1前脂肪细胞。采用油红O染色和比色定量检测细胞内脂肪生成及细胞分化程度,以MTT法检测细胞的增殖。结果显示,与空白相比,用不同浓度的sporamin蛋白处理后,3T3-L1前脂肪细胞的分化受到明显地抑制。当sporamin蛋白浓度增至0.500mg·mL-1时,脂滴生成量明显减少,洗脱液吸光度值降至最低为0.35(p<0.05)。此外,高浓度的sporamin蛋白能有效地抑制3T3-L1前脂肪细胞的增殖,且随着处理时间的延长抑制效果更加明显(p<0.05).最后,用昆明种小鼠为试验动物,通过体重、脂/体比、血脂和饮食量等指标研究sporamin蛋白对营养性肥胖的预防和减肥作用。结果表明,sporamin蛋白对高脂饲料所致小鼠的肥胖症具有预防和改善作用:①Spopramin蛋白在给定剂量内对小鼠不具有毒性作用②Sporamin蛋白能通过降低小鼠的体重、抑制小鼠食欲来预防和治疗肥胖.③Sporamin蛋白对小鼠血清总胆固醇、血清甘油三酯的升高及高密度脂蛋白胆固醇水平的降低具有明显的抑制作用,同时可降低小鼠患动脉粥样硬化的可能性。本研究表明,sporamin蛋白具有良好的减肥降脂作用,可作为一种新型的保健食品进行开发和利用。
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