论文部分内容阅读
目的：观察转染视网膜母细胞瘤蛋白结合锌指结构基因1(RIZ1基因)后,食管鳞状上皮细胞癌细胞株TE13基因表达谱的改变,探讨RIZ1基因在食管鳞癌中可能的作用机制。方法：1.培养食管鳞癌TE13细胞株,1：10传代后培养至对数生长期,脂质体法分别转染pcDNA3.1和pcDNA3.1(+)/RIZ1真核表达载体。2.确认转染成功后,应用Agilent人类全基因表达谱基因芯片筛选转染前后的差异基因(差异倍数foldchange≥2或≤0.5),对差异基因进行基因本体论、通路分析。3.随机选取部分差异基因,用逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction, RT-PCR)法检验转染RIZ1基因后,TE13细胞株中相应mRNA表达水平,验证与基因芯片结果的一致性。结果：RIZ1基因在TE13细胞株中转染成功,基因芯片结果显示RIZ1基因转染食管鳞癌细胞株TE13后引起的差异基因共2123个,其中上调960个,下调1163个,RT-PCR法验证差异基因mRNA表达水平与芯片结果一致率为88.9%(8/9)。对差异基因功能进行分析显示,差异基因主要与细胞发育、病毒复制的监管、淋巴细胞共刺激、免疫系统发育等功能簇相关。差异基因的信号通路主要集中于细胞因子受体互相作用、转化生长因子p信号途径、促分裂素原活化蛋白激酶通路、血管内皮生长因子信号通路等。结论：转染RIZ1基因后引起食管鳞癌细胞株TE13基因表达谱广泛的变化,其潜在的下游基因及其蛋白产物可能可能通过RIZ1的抑癌作用可能通过细胞因子受体互相作用、转化生长因子β信号途径、促分裂素原活化蛋白激酶通路、血管内皮生长因子信号通路等信号通路,参与肿瘤细胞发育、病毒复制的监管、淋巴细胞共刺激、免疫系统发育等功能调控。同时病毒感染可能参与了相关肿瘤基因功能的调控。