甜瓜雌雄异花同株遗传分析与基因定位的研究

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甜瓜是葫芦科重要的经济作物之一。大多数甜瓜是雄全同株材料,而雌雄异花同株材料除了在育种过程中能减少大量复杂的去雄工序外,其F1果实发育也要强于雄全同株材料。因此,培育雌雄异花同株材料,成为重要的育种目标之一。本试验调查各杂交组合分离后代、回交后代的开花类型及分离情况,对甜瓜雌雄异花同株遗传规律进行了分析,同时筛选出与甜瓜雌雄异花同株性状连锁的分子标记,探索了利用分子标记分析甜瓜雌雄异花同株性状的可能性,为利用分子标记辅助选择甜瓜育种,加快育种进程,开辟了新的技术途径。本试验选择亲本材料分别为:母本3-2-2,来自中国,薄皮甜瓜,雌雄异花同株材料;父本TopMark,来源美国,厚皮网纹甜瓜,雄全同株材料;检验亲本:WI998,来源美国,网纹甜瓜,全雌株材料。常规手段配制杂交组合3-2-2×TopMark,借鉴刘威、路绪强试验中配置的杂交组合WI998×TopMark、WI998×3-2-2,调察各杂交组合F1、F2、BC1P1、BC1P2开花类型及分离比率,确定各亲本基因型。从3-2-2×TopMark组合F1代中取出350粒种子,通过连续自交,得到F1S6代重组自交系群体(RILs)共152株,用于构建遗传图谱。调查3-2-2×TopMark组合F2代的开花类型,结果表明:雌雄异花同株性状主要受一对主效基因控制;研究雌花率结果显示:雌花率受到一对主效基因控制,同时存在微效基因,主效基因遗传率为83.3%,微效多基因遗传率为8.125 %。调查WI998×3-2-2组合的F1、F2、BC1P1、BC1P2群体确定该组合杂交后代是由两对基因控制;调查WI998×TopMark杂交组合F1、F2、BC1P1、BC1P2群体确定该杂交组合后代由两对基因、一对修饰基因控制。综合分析上述三个杂交组合,确定雌雄异花同株材料3-2-2的基因型为AA,雄全同株材料TopMark基因型为aa,本试验中3-2-2×TopMark的杂交后代只有一对基因表达。控制甜瓜性别分化共有三对基因,M基因为微效基因,试验结果提出存在另一微效基因F,协同M基因控制三性花株与雌全同株性别表达。筛选428对SSR分子标记(其中包括380对EST-SSR标记,48对g-SSR标记),得到94对具有多态性的标记,其片段大小分布在150~300bp,多态性比例占21.29%;筛选256对EcorI/MseI AFLP引物组合,得到22对AFLP多态性引物,共含有146个AFLP多态性位点,其片段大小分布在100~600bp之间。利用3-2-2×TopMark杂交组合得到152株重组自交系群体(F1S6),构建甜瓜遗传图谱。该图谱包括70个SSR标记,100个AFLP标记及1个形态标记,图谱由17个连锁群构成,覆盖基因组总长度为1222.9cM,最长连锁群为LG1(197.4 cM),最短的连锁群为LG5(11.0 cM),标记之间平均距离为7.19 cM,标记间最大连锁距离为34.4 cM,标记间最小连锁距离为0;10个标记与A基因在同一连锁群,该连锁群覆盖基因组长度55.7 cM,找到两个与雌雄异花同株性状连锁的分子标记MU13328-3、E33M43-1,与A基因的遗传距离分别为4.8 cM和6.0 cM。本试验分析了雌雄异花同株遗传规律,确定了甜瓜雌雄异花同株材料的基因型,不仅对甜瓜性别基因的研究提供了方法与指导,同时构建了较饱和的甜瓜永久遗传连锁图谱,对今后深入开展甜瓜雌雄异花同株基因的分离与图位克隆具有重要的理论价值。
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