农产品典型真菌毒素磁珠同步富集净化及免疫检测技术研究

来源 :安徽农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shenqian1015
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
真菌毒素是一类由曲霉属、镰刀菌属等真菌产生的小分子次级代谢产物,其种类繁多,目前已知的真菌毒素多达400多种,其中有30多种对人类生命健康具有严重危害,致畸、致癌、致突变。真菌毒素污染在农作物的生产、储藏、运输以及加工等各个环节都有可能发生,覆盖范围较广。研究发现,某些真菌可同时产生多种真菌毒素,且农产品食品中多种真菌及其产生的毒素混合污染的现象普遍,一旦进入人体,会产生协同或联合毒素效应。因此,亟需快速高灵敏同步真菌毒素检测技术及时发现污染,避免危害。然而,现有真菌毒素检测技术受农产品基质影响,稳定性较差,多种真菌毒素同步提取富集技术匮乏,亟需研制高效的样品前处理方法和稳定、高灵敏的真菌毒素同步检测技术,是目前真菌毒素检测领域研究的热点难题。本研究以黄曲霉毒素B1(AFB1)和玉米赤霉烯酮(ZEN)为对象,探索多种真菌毒素免疫磁珠富集净化同步提取技术,创建AFB1和ZEN时间分辨荧光免疫层析同步检测技术,为农产品多种真菌毒素混合污染监管提供技术支撑。本研究的主要内容如下:(1)建立了农产品中黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮免疫磁珠富集净化同步提取技术,为农产品中多种真菌毒素同步快速检测方法的创建提供可行的前处理方法。以抗AFB1和ZEN的两种单克隆抗体为特异性靶向结合元件,研制了同步富集净化AFB1和ZEN的免疫磁珠。优化了样品提取剂种类、上样缓冲条件、免疫磁珠用量、亲和吸附反应时间以及洗脱液体积等条件,采用高效液相色谱(HPLC)技术,对农产品中AFB1和ZEN同步富集净化前处理方法回收率进行验证。结果显示,AFB1和ZEN两种真菌毒素的空白基质加标回收率在73.49%~105.60%之间,相对标准偏差(RSD)小于4.5%。表明建立的同步前处理方法具有较好的回收率和重复性,具有净化效果好、操作简便、回收率高等特点,可用于农产品实际样品中AFB1和ZEN两种真菌毒素的同步富集净化。(2)建立了AFB1和ZEN时间分辨荧光免疫层析同步检测技术,为农产品多种真菌毒素混合污染监管提供技术支撑。分别将抗AFB1和ZEN的两种单克隆抗体与羧基化的铕荧光微球偶联制备免疫荧光探针,通过优化缓释液种类、抗体标记量、免疫探针用量以及包被抗原的浓度等条件,建立了同步检测AFB1和ZEN的时间分辨荧光免疫试纸条。该方法对AFB1和ZEN两种真菌毒素的检出限分别达0.027、0.050μg/kg,在玉米和花生空白基质加标回收实验中,回收率在87.27%~100.13%之间,相对标准偏差(RSD)小于3.7%。采用该方法和HPLC方法进行比较,检测实际样品中AFB1和ZEN的含量,结果显示两种方法的检测结果相当。表明该方法具有稳定性好、灵敏度高、快速便捷等特点,可以满足农产品多种真菌毒素现场快速检测的需求。
其他文献
光伏发电因具有环保、可持续、运营成本低等优点,近年来得到了快速大规模发展。光伏组件是光伏发电系统的重要单元,在长期运行中受到环境、电应力等因素影响,易出现衰退现象,导致输出功率降低、寿命缩短、经济收益下降。分析光伏组件衰退机理及模式,并进行寿命预测,可为光伏组件的运行维护提供技术支持,对提升光伏发电系统的稳定性、可靠性和经济效益具有重要的理论和实用价值。针对光伏组件衰退分析与寿命预测问题,论文通过
学位
2022年1月1日“区域全面经济伙伴关系协定(RCEP)”正式在有关国家实施~1,标志着世界上最大的自由贸易区雏形得以初步奠定,中国对外贸易潜力也进一步扩大。然而近几年中国对外贸易也面临来自国内外的压力。首先,中国国内经济增长放缓,经济结构转型升级乏力是外贸发展的重大挑战;其次,RCEP其他成员国也存在不同的地缘政治背景,比如中日、中澳关系时常紧张,南海问题争端频发,东南亚部分国家经济发展相对滞后
学位
基层治理是国家治理的基石,党的十九届四中全会精神指出推进国家治理体系和治理能力现代化的关键一环是要重点夯实基层治理[1]。在基层治理中,基层公务员发挥着至关重要的作用,其职业幸福感与工作成效息息相关,在一定程度上也影响着基层治理体系现代化发展。因此,深入研究基层公务员的职业幸福感,从而找到提升职业幸福感的有效策略意义十分重大。在确定以福州市长乐区基层公务员群体作为研究对象后,开展一对一个人访谈,设
学位
本文是笔者参与跨国音乐制作项目的实践报告,该项目由中美两国团队合作为大型开幕式制作游戏相关音乐。笔者在译后总结时发现汉英交传中有较多译语冗余现象,影响了翻译效果。通过分析,这些译语冗余主要是因为过于追求形式对等而导致的。因此,笔者以口译录音为材料,结合奈达的功能对等理论,在对冗余相关研究回顾的基础上,对口译实践中出现的冗余现象进行分类分析,并提出相应应对策略。本文将冗余划分为词汇层面冗余,句子层面
学位
萱草(Hemerocallis fulva L.)是国际公认的三大宿根花卉之一,不仅可以作为观赏植物用于园林绿化及盆栽应用,而且具有较高的食用价值。乙醇脱氢酶(alcohol dehydrogerase,ADH,EC1.1.1.1)基因家族成员在抵抗非生物胁迫过程中起着重要的作用,但是不同的基因家族成员功能不同。目前关于ADH基因家族的研究主要集中模式植物中,在观赏植物中研究甚少。本研究以二倍体萱
学位
毫米波雷达手势识别作为一种无接触式人机交互方式,在智能驾驶、远程医疗、体感游戏等领域具有广泛的应用前景。传统毫米波雷达手势识别方法将回波信号通过时频分析转换成频谱特征图,再按照图像分类的方法识别手势。这种通过预处理雷达回波获得的手势样本包含的特征信息会有损失,导致分类模型在其他数据上的鲁棒性较差。本文基于毫米波雷达回波的时间相关性特征,采用深度学习的时域建模方法展开研究,主要工作如下:1.传统的毫
学位
水力压裂是油气田开采的重要措施,但是水力压裂技术耗水量大且存在粘土水化膨胀问题,随着油气田的不断开发以及技术的进步,亟需提出新的开采方法。液氮压裂作为一种新型的压裂技术,逐渐的成为热点问题。以川西新场区块储层为模拟对象,采用扩展有限元方法对液氮压裂过程进行研究,同时与水力压裂裂缝的形态进行了对比,相同条件下,液氮压裂得到的人工裂缝在宽度和长度上均优于水力压裂。主要工作包括:(1)建立了液氮和页岩储
学位
随着人类社会的发展,经济条件、生活水平不断提高,广大群众对健康越来越关注,对高层次、广范围的全民健康有了更多的期待。为了多方面满足社会各类群体对健康、医疗、护理方面的需求,我国家庭医生签约服务在各地有序推进实施。Y市自2017年以来全面推进家庭医生签约服务,在签约形式、服务内容方面取得一定的成效,但仍然存在一些问题,如财政投入不足、配套政策不齐、家庭医生能力不强等,还有居民知晓率、签约率、满意度有
学位
进入20世纪后,我国交通系统迅速地发展,其中地铁凭借快捷、安全、运输量大、绿色环保且不占地上资源等优势成为普遍使用的出行工具。而地铁换乘站作为地下交通系统主要的换乘枢纽,具有空间结构复杂、封闭性强、客流量大、人员较为密集等特点。因此,在发生火灾时,如何高效安全地进行人员疏散引导是目前仍需探讨的重要课题。本文首先考虑火灾疏散影响因素,对现有的地铁换乘站疏散引导方案进行评估,并提出一种考虑引导因素的火
学位
辣木(Moringa oleifera)目前已在我国形成了种植规模,其籽(Moringa oleifera seed,MOS)资源丰富,蛋白含量高(>30%),氨基酸种类齐全,且必需氨基酸组成与大豆相似,是一种优质的新型蛋白资源。大多数辣木籽蛋白(MOSP)相关的研究主要在净水方面,常采用盐法进行提取,并且据说MOSP具有多个等电点;但其在食品开发应用方面的报道极少,故盐法提取后沉淀MOSP的方法
学位