目的：通过比较正常与去卵巢骨质疏松（Osteoporosis，OP）大鼠骨髓间充质干细胞（Mesenchymal stem cells，MSCs）的生物学特性，探讨去卵巢对大鼠MSCs的影响；研究骨碎补及淫羊藿水提液、淫羊藿苷及柚皮苷、益骨胶囊含药血清及细胞因子转化生长因子β₁（Transforming growth factor-betal，TGF-β₁）、骨形成蛋白-2（Bone morphogenetic protein-2，BMP-2）对MSCs增殖和骨向分化能力的影响，并观察确有防治OP疗效的单味中药、中药单体、中药复方对Smads蛋白通路中上游细胞因子TGF-β₁、BMP-2的影响，分析它们可能的作用途径，为阐释其防治OP的作用机理提供实验依据，并为以TGF-β₁、BMP-2作为平台筛选防治OP药物提供可行性实验探索。方法：1．运用全骨髓贴壁法分离培养MSCs；2．通过形态学、流式细胞仪检测表面标志物及多向分化能力鉴定MSCs；3．选用10月龄Sprague-Dawley（SD）雌性大鼠双侧卵巢切除增龄3月法复制OP模型；4．通过比较正常与OP大鼠MSCs形态学、生长曲线、生长周期及骨向、脂向软骨向分化能力探讨去卵巢对大鼠MSCs的影响；5．运用MTT法检测不同浓度各干预药物对大鼠MSCs增殖的影响，以确定其最佳促增殖剂量；6．以碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase，ALP）确定各干预药物不同浓度梯度中最佳促MSCs骨向分化剂量；7．实验分为空白组、经典组(10^-8地塞米松+10 mmol／Lβ-甘油磷酸钠+50μmol／L维生素C)、药物组（药物最佳诱导骨向分化剂量）和药物+经典组(药物最佳诱导骨向分化剂量+10^-8M地塞米松+10 mmol／Lβ-甘油磷酸钠+50μmol／L维生素C)，通过检测诱导分化过程中ALP、Ⅰ型胶原（TypeⅠcollagen，ColⅠ）、骨钙素（Bone gla protein，BGP）和钙化结节等指标的表达，来观察其对MSCs骨向分化能力的影响；8．ELISA法检测各药物骨向分化过程中TGF-β₁、BMP-2的表达，阐释其促MSCs骨向分化可能的作用机制；9．Real-time PCR法检测rhBMP-2、rhTGF-β₁对Smad4及其下游细胞因子Cbfα1 mRNA，进一步阐释各药物诱导MSCs骨向分化可能的作用机制。结果：1．流式细胞仪检测大鼠MSCs表面标志抗原CD44、CD29表达阳性，CD45及CD34表达阴性，MSCs能成功诱导为成骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞；2．与正常组相比，OP大鼠MSCs体外增殖能力下降，其骨向分化能力及对成骨诱导剂反应力降低，脂向分化能力及对成脂诱导剂反应力增强，对软骨诱导剂反应力下降；3．骨碎补和淫羊藿水提液最佳促MSCs增殖浓度均为5μg／ml，最佳促MSCs骨向分化浓度分别为50μg／ml、500μg／ml。骨碎补和淫羊藿水提液诱导各组均能促进成骨指标的表达，且伴随TGF-β₁和BMP-2分泌增加；4．低灌胃剂量益骨胶囊灌胃1 h后采血所得含药血清以25％的浓度干预时具有最佳的促MSCs增殖作用；最佳益骨胶囊含药血清促MSCs骨向分化浓度是高灌胃剂量灌胃1h后采血所得含药血清25％-30％添加浓度；益骨胶囊含药血清诱导各组均能促进成骨指标的表达，且伴随TGF-β₁和BMP-2分泌增加；5．前期研究证实确有促MSCs骨向分化能力的中药单体淫羊藿苷和柚皮苷各诱导组均伴随TGF-β₁和BMP-2分泌增加；6．rhTGF-β₁和rhBMP-2最佳促MSCs增殖浓度分别为10 ng／ml和80 ng／ml，最佳促MSCs骨向分化浓度分别为5 ng／ml和40 ng／ml，rhTGF-β₁和rhBMP-2诱导各组均能促进成骨指标的表达，且伴随TGF-β₁和BMP-2分泌增加；7．rhTGF-β₁和rhBMP-2诱导各组均能提高Smad4和核心结合因α1（Core binding factor alpha1，Cbfα1）mRNA的表达量。结论：1．采用全骨髓贴壁法可获得稳定、均质性良好的大鼠MSCs；2．OP大鼠MSCs骨向及软骨向分化能力下降，脂向分化能力增强：3．中药骨碎补和淫羊藿水提液、益骨胶囊含药血清及细胞因子TGF-β₁、BMP-2均能促进MSCs骨向分化；4．在MSCs骨向分化过程中，上调TGF-β₁、BMP-2的表达量可能是各干预药物促进MSCs骨向分化的作用机制之一；5．各诱导药物可能通过增加TGF-β₁和BMP-2的分泌量，进而上调Smad4和Cbfα1mRNA的表达，来刺激MSCs骨向分化。