【摘 要】
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乌头种植存在化学肥料过量施用及植株病害严重的困扰。因而亟需寻求高效绿色的途径如生物肥料及生防材料以提高种植效益,本研究从健康乌头植株分离可培养内生细菌,通过Salkowski比色法测定其产吲哚乙酸能力,利用16S r DNA限制性片段长度多样性（16S r DNA-RFLP）及16S r DNA全长序列研究高产吲哚乙酸内生细菌遗传多样性及系统发育地位,采用平板法测定菌悬液浸泡后水稻种子萌发率和室内
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乌头种植存在化学肥料过量施用及植株病害严重的困扰。因而亟需寻求高效绿色的途径如生物肥料及生防材料以提高种植效益,本研究从健康乌头植株分离可培养内生细菌,通过Salkowski比色法测定其产吲哚乙酸能力,利用16S r DNA限制性片段长度多样性（16S r DNA-RFLP）及16S r DNA全长序列研究高产吲哚乙酸内生细菌遗传多样性及系统发育地位,采用平板法测定菌悬液浸泡后水稻种子萌发率和室内水培法探究产吲哚乙酸内生细菌对水稻幼苗生长的影响;使用平板对峙法初筛拮抗乌头白绢病及根腐病内生细菌并通过大田试验进行复筛验证乌头拮抗内生细菌对乌头植株生长的影响及抗病效果。主要结果如下:（1）从四川、陕西、云南乌头主要种植区采集健康乌头植株,并从植株不同组织器官分离内生细菌285株,其中:从四川地区分离到114株（根部52株,茎部37株,叶部25株）,陕西地区70株（根部37株,茎部31株,叶部2株）,云南地区101株（根部45株,茎部40株,叶部16株）。（2）上述分离得到的内生细菌中有162株可分泌吲哚乙酸,其中来自四川的高产吲哚乙酸菌株有24株,经16S r DNA鉴定分属于肠杆菌属（Enterobacter）、克雷伯式杆菌属（Klebsiella）、泛菌属（Pantoea）、假单胞菌属（Pseudomonas）、微杆菌属（Microbacterium）、芽孢杆菌属（Bacillus）、鞘氨醇杆菌属（Sphingobacterium）和金黄杆菌属（Chryseobacterium）;来自陕西的高产吲哚乙酸菌株有10株,分属于假单胞菌属（Pseudomonas）、Priestia、沙雷氏菌属（Serratia）和芽孢杆菌属（Bacillus）;来自云南的高产吲哚乙酸菌株有6株,分属于新鞘脂菌属（Novosphingobium）、农杆菌属（Agrobacterium）、假单胞菌属（Pseudomonas）和芽孢杆菌属（Bacillus）。从以上乌头高产吲哚乙酸内生菌菌株中进一步筛选到JY-1-1S、JY-3-6S和JY-10-1L等对水稻种子萌发和幼苗生长表现出较好促生效果的内生细菌。（3）在所分离的乌头内生细菌中筛选到1株乌头内生细菌JY-7-2L拮抗病原菌活性最强,且其在田间接种后能显著降低乌头植株田间病害发病率,经16S r DNA鉴定其属于芽孢杆菌属（Bacillus）的枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。结果表明,乌头植株蕴含大量内生细菌资源,并具有产吲哚乙酸及拮抗乌头白绢病、根腐病病原菌的能力。本研究筛选出3株对水稻种子萌发和幼苗生长有显著促进作用和1株显著抑制乌头植株病原菌生长的内生细菌,可为乌头相关微生物肥料及生物菌剂的研制提供优质菌种资源,为道地产区乌头种植的绿色可持续发展提供理论与技术支撑。
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