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多溴二苯醚(PBDEs)作为一类持久性有机污染物,其对神经发育的影响备受关注。但是目前关于PBDEs的胎儿早期暴露和脑中富集及血脑传输规律的认识还很有限。围绕这三个问题,本论文开展了以下研究: 1.PBDEs的胎儿早期暴露:胎儿发育早期对化学污染物的损伤最为敏感,关于此阶段的PBDEs暴露还少有报道。本研究以浙江台州电子垃圾拆解区周边区域为研究现场,采集配对早期流产胚胎(孕龄:10~13周)、早期胎盘以及母亲静脉血等人体样品,开展了PBDEs在早期胚胎中的富集及血胎传输研究。结果发现,所有样品中均有PBDEs的存在,且胚胎中含量显著低于母血含量,显示妊娠早期PBDEs即可进入胎儿体内。胚胎、胎盘和母血配对样品中PBDEs含量显著相关,显示通过母血中PBDEs含量可估算早期胚胎中PBDEs的暴露负荷。由PBDEs同类物在胚胎、胎盘以及母血中的分布特征分析妊娠早期血胎传输,发现低溴代物较高溴代物更易透过胎盘屏障进入胎儿体内富集,而高溴代物更易被胎盘组织滞留。 2.PBDEs在动物脑中富集:鉴于目前有关PBDEs脑中富集和血脑传输规律认识的缺乏,尤其是人脑材料的不可获得性,本研究采集台州地区一个电子垃圾拆解点的野生鱼、蛙、鸡、鸭以及家鼠等生物样品,开展了PBDEs在不同生物脑中的富集研究。结果发现除鱼外,其他生物脑中PBDEs的含量均显著低于肝脏和肌肉组织中含量,这一规律可能与血脑屏障(BBB)的屏障作用有关。进一步用PBDEs浓度的脑肝比粗略表征PBDEs通过BBB在脑中富集的能力,发现鱼脑富集PBDEs的能力最强,蛙脑次之,鸡、鸭和家鼠的脑最弱。从不同同类物的脑肝比来看,较高等生物种的低溴代物比高溴代物更易在脑中富集,这一规律在家鼠中最为明显,显示较高等生物的BBB对高溴代物的屏障作用可能强于对低溴代物的屏障作用。 3.血脑屏障体外模型:为验证以上关于PBDEs血脑传输规律的推测,并为更多有机污染物的血脑传输研究提供一种有效的手段,本研究借鉴药物血脑传输研究的模型,在本实验室建立起Sprague-Dawley(SD)大鼠原代脑微血管内皮细胞(BMECs)和星形胶质细胞(Astrocytes)在transwell小室中的细胞共培养BBB模型。通过检测细胞形态、紧密连接、跨膜电阻值以及指示物荧光素钠和FD-40S的渗透系数等指标对模型的质量进行鉴定,结果显示该模型在屏障完整性和渗透功能等方面保留了良好的在体BBB特性,可以用于有机污染物的血脑传输研究。 4.PBDEs血脑传输规律:利用建立的体外BBB模型,首次对PBDEs的血脑传输规律开展研究,发现四溴-十溴取代PBDEs的渗透系数范围为3.86×10-7~3.27×10-6cm/s,整体上渗透系数随溴原子取代数目的增加而降低。相关性分析结果显示,同类物渗透系数与其分子量、Log Kow、分子极性、分子极性表面积(SAG)、分子体积、qBr+和qO-呈显著负相关,与Ehomo、Elumo呈显著正相关。最后,利用QSAR模型建立了PBDEs透过BBB的单因素(DP02)预测方程。 综上所述,本研究获得了人体早期胚胎PBDEs暴露和生物体脑组织PBDEs富集及传输的数据,可为胎儿PBDEs暴露风险及发育神经毒性研究提供支持。同时,借鉴药物传输的BBB体外模型,实验室研究了PBDEs的血脑传输规律,与现场监测获得的结果基本吻合。这是利用体外BBB模型研究有机污染物血脑传输规律的首次尝试,为研究有机污染物的神经暴露风险提供了一个新的思路。