产生物表面活性剂菌株的筛选及其对油泥洗脱效果的研究

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生物表面活性剂是一类含有亲水和亲油基团的物质,具有化学合成表面活性剂所无法比拟的环境兼容性及广阔的发展前景,日益受到国内外科学界的关注。由于生物表面活性剂具有很好的乳化性、可降解性及无毒性,使其在生物修复和其它应用中倍受重视,用微生物及其产物进行油泥洗脱己成为一种极具应用潜力的技术。本研究从长期被石油污染的土壤中取样,进行了菌种的分离,从中分离出了能以原油为碳源进行生长的菌株,幷通过测发酵液表面张力的方法筛选到产生物表面活性剂的菌株。本论文主要从生物表面活性剂产生菌的筛选、菌种鉴定、发酵条件的优化以及生物表面活性剂的提取和结构组成分析等方面作了研究,为其以后的研究奠定了基础。本试验分离到一株细菌BS-5,该菌能利用原油为唯一碳源生长代谢。随后对筛选出的BS-5菌株进行系统鉴定,通过形态观察、Biolog鉴定和16S rDNA同源序列比对和进化树分析,发现BS-5菌株为革兰氏阴性、短杆状,其中经Biolog细菌鉴定系统分析,菌株BS-5为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa),可能性(Probability)为99%,相似率(Similarity)为0.770。另外,该菌的16S rDNA序列与GenBank中的铜绿假单胞菌有99%的同源性。因此,可初步鉴定该菌为铜绿假单胞菌(P. aeruginosa)。利用薄层层析(TLC)和红外光谱(FT-IR)等手段分析表明该菌株所产生物表面活性剂为糖脂类物质。采用正交试验方法,确定菌株BS-5生物表面活性剂的适宜培养基组成和适宜培养条件。结果表明该菌株的适宜培养基组成为(g·L-1):植物油10,MgSO4 0.2,K2HPO4 1.0,KH2PO4 1.0,蛋白胨1.0,FeSO4 0.05,CaCl2 0.02,初始pH值7.5。该菌株产生物表面活性剂的适宜培养条件为:温度35℃。使用菌株发酵液处理油泥样品,8天洗脱率达45%,洗脱效果显著。
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