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目的:本课题通过研究豁痰祛瘀法对四氧嘧啶(Alloxan)糖尿病大鼠早期内耳病变中细胞凋亡的防护作用,初步探讨糖尿病导致内耳病变及耳聋的可能机制及豁痰祛瘀法对其影响。 方法:采用四氧嘧啶(alloxan)腹腔注射诱发糖尿病内耳病变大鼠模型,同时用中药复方高、低剂量灌胃治疗,并设立空白组、模型组、西药都可喜组(都可喜灌胃)、西药复合组(都可喜+优降糖混合灌胃),运用耳蜗细胞分离技术、细胞培养、免疫组化、激光共聚焦显微技术、原位杂交、ABR、TUNEL、电镜等先进技术和研究手段,首次全面地观察了豁痰祛瘀法对四氧嘧啶诱发糖尿病耳聋大鼠早期的防治作用;首次从细胞因子、信号传递等方面对豁痰祛瘀法改善糖尿病大鼠耳蜗细胞的凋亡的防治作用机理进行了深入、系统的研究。 结果:豁痰祛瘀法改善糖尿病耳聋大鼠饮食、饮水、尿量、毛色等一般状态。豁痰祛瘀法可改善血糖、血液流变学指标,降低糖尿病大鼠血脂水平;提高糖尿病大鼠ABR阈值;降低耳蜗外毛细胞内游离Ca2+水平;一氧化氮合酶(NOS)、原癌基因(c-jun)、死亡因子(fas)在大鼠外毛细胞、螺旋神经节细胞、血管纹细胞处等有阳性表达,中药复方组阳性表达低于模型组(P<0.05);用原位杂交法观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)受体基因在糖尿病大鼠内耳支持细胞处有明显表达,而正常大鼠耳蜗组织此部位没有表达;TUNEL可以见到糖尿病大鼠耳蜗毛细胞、螺旋神经节细胞、血管纹内皮细胞出现凋亡细胞,而正常组无阳性凋亡细胞,模型组TUNEL阳性细胞数均明显高于中药复方组(p<0.05),电镜下可见凋亡的螺旋神经节细胞。 结论:糖尿病引起的耳蜗及神经损害,可能与糖尿病血液高凝状态成都中医药大学博士学位论文有关。豁痰祛癖中药能缓解糖尿病大鼠内耳微血管病变,改善微循环障碍,缓解血管壁增厚及管腔变窄状况,从而延缓了内耳病变的进程:豁痰祛癖中药能够抑制糖尿病导致的耳蜗外毛细胞、螺旋神经节细胞等细胞的凋亡,改善听功能。