如何更好地了解和保护眼睛一直是眼科学研究者们的目标。正常情况下，人从外界获得信息的75％-87％来自视觉，90％的行为是对视觉信息的反馈。人的眼睛是一个高度精密的光学系统。许多具有特殊功能的眼组织共同组成了这个系统。例如，角膜是光信号进入视觉系统所需要穿越的第一层眼组织，它直接收集外部光信息；视网膜实现感光并且将光信号转换为电信号，再传输给神经网络。视网膜中的视网膜色素上皮层(RetinalPigmentEpithelium,RPE)是眼底吸收光线最多的一层。鉴于角膜和RPE在眼组织中特殊的重要性，我们在激光扫描共聚焦显微镜和飞秒激光器为基础构建的系统上，分别开展了猪眼角膜和RPE的多参量测量研究，以期了解角膜上皮的自体荧光特点，角膜基质的胶原分布特点以及RPE在单光子和双光子激发条件下的光谱特性和光损伤机制。 对于角膜，由于上皮层和基质层的不同的组织特点，我们分别对它们采取了单光子激发荧光和二次谐波测量，实现了层析成像，得到了六层上皮细胞的荧光图像。对于RPE，采用单光子和双光子激发，研究了其自体荧光光谱及在激发前后光谱的变化，我们发现，随着单光子激发时间的增加，RPE的荧光光谱在700nm以上的长波段出现了强度逐渐增强的新荧光峰，而原有的600nm左右的荧光峰强度被逐渐增强的散射光所掩盖了；而随着双光子激发时间的增加，RPE的荧光光谱峰的位置由原来的590nm蓝移至540nm，而且荧光强度逐渐增强。我们同时还测量和分析了双光子激发条件下RPE的荧光寿命。 初步的实验结果表明：可以通过自体荧光和二次谐波实现角膜层析分辨成像，该方法有望用于了解准分子近视矫正手术后角膜的复原过程，实现某些角膜疾病的眼科检查和诊断。而对于RPE，可以通过其自体荧光光谱特性判断单光子激发和双光子激发条件下RPE细胞的光损伤，该方法有望应用于临床诊断。