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脂褐素,又称年龄色素,是人体老化的重要标志。脂褐素不能被降解,也不能被胞吐清除,在有丝分裂和衰老后的动物长寿细胞的溶酶体和细胞质中积累,从而导致多种与年龄相关的慢性疾病恶化,如阿尔茨海默症、帕金森病、糖尿病等。天然抗氧化剂在自然界普遍存在,具有抗氧化、延缓衰老和促进机体健康作用。但目前天然抗氧化剂对脂褐素的清除作用还不清楚。本研究通过构建体外类脂褐素模型探究食品成分和天然抗氧化剂对类脂褐素的体外影响;并进行动物实验,筛选对脂褐素具有较好清除作用的天然抗氧化剂,对抗老延年、预防老年疾病的发生,促进人类健康等均具有重要而现实的意义。主要工作及研究结果如下:(1)类脂褐素体外模型构建。以牛血清白蛋白(BSA)和丙二醛(MDA)的反应为基础,分别探究MDA浓度、时间、p H值、温度对类脂褐素形成的影响。结果表明类脂褐素体外模型适宜条件是1 mg/m L的BSA与2 mmol/L的MDA,在37℃、p H 7.4的0.1 mol/L磷酸盐缓冲液中孵育72 h,在此条件下构建的体外类脂褐素模型接近人体环境,可以用于天然抗氧化剂对类脂褐素的体外清除研究。(2)食品成分对类脂褐素荧光强度的影响。通过将不同的食品成分(植物油、食用糖、维生素、金属离子)分别与类脂褐素体系反应。结果表明,按照人体的日常摄入量,食品成分中的植物油、果糖和维生素C对类脂褐素形成均具有抑制作用,而葡萄糖、VE和金属离子对类脂褐素没有明显影响。(3)天然抗氧化剂对类脂褐素体外清除作用。将不同的天然抗氧化剂分别与类脂褐素体系反应,以半抑制浓度(IC50值)为指标研究了天然抗氧化剂对类脂褐素的清除作用。结果表明,单宁、白藜芦醇、芦丁、槲皮素、花青素、茶多酚、番茄红素、原花色素、虾青素、谷胱甘肽、硫辛酸的IC50值分别为:0.021 mmol/L、0.024 mmol/L、0.0379 mmol/L、0.130 mmol/L、0.151 mmol/L、0.157 mmol/L、0.163 mmol/L、0.182mmol/L、0.220 mmol/L、2.439 mmol/L、25 mmol/L。芦丁、白藜芦醇、茶多酚和花青素对类脂褐素体外清除作用较强,因此选择作为动物实验的原料。(4)天然抗氧化剂对脂褐素的体内清除效果。通过对昆明小鼠注射D-半乳糖构建动物衰老模型,同时用抗氧化剂对小鼠进行灌胃处理,测定小鼠血清、肝脏和脑组织中的超氧化物歧化酶(SOD)活力、MDA含量和脂褐素含量,根据各指标的变化综合评价各抗氧化剂对小鼠体内脂褐素的清除作用。结果表明,衰老模型组小鼠的各项指标与正常对照组相比没有显著差异(P>0.05)。与模型组相比,芦丁和花青素组血清中SOD水平提高,血清、肝和脑组织中MDA和脂褐素水平降低,而白藜芦醇、VE、茶多酚和复合组中这些指标的变化无规律。天然抗氧化剂对脂褐素的体内清除作用还有待进一步研究。