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刺五加提取液是利用五加科植物刺五加的根及根茎加工获取的。由于刺五加提取液具有镇静安神、抗疲劳、降血脂及增强免疫力等功能被广泛应用于中药、保健食品生产中。刺五加的根部含多种甙,经层析实验分离主要成份为A、B、C、D、E、F及G七种甙,它们的含量比例3∶30∶10∶12∶4∶2∶1,这七种甙的混合物即刺五加提取液;其中刺五加甙B的含量最高占30%,刺五加甙B又称为紫丁香甙。因此本文以紫丁香甙作为研究对象采用柱层析法,从刺五加提取液中提取了紫丁香甙,通过高效液相色谱法定性、定量测定紫丁香甙的含量,实验结果表明提取的紫丁香甙含量达到96.8%与市售紫丁香甙试剂盒比较可以证明提取紫丁香甙为纯品且性质稳定。将测得的紫丁香甙进行了保健功能的动物实验,实验结果证明紫丁香甙具有降血脂增强免疫力的功能,是刺五加提取液中降血脂、增强免疫力的功效成份。本研究结果为紫丁香甙作为功效成分开发保健食品提供了重要实验依据,在保健食品的功能方面具有重要的参考价值和实际价值。 研究内容: 1.柱层析方法提取刺五加提取液中的紫丁香甙 2.高效液相色谱法定性定量测定紫丁香甙的含量 3.紫丁香甙降血脂功能 4.紫丁香甙增强免疫力功能 研究结果: 1.采用萃取、重结晶、柱层析等方法从刺五加提取液中提取出紫丁香甙。吉林大学硕士学位论文 2.高效液相色谱法定性、定量测定紫丁香式的含量。 2.1建立实验方法 采用岛津公司生产的高效液相色谱,C一18柱甲醇比=1:4做为流动相,以紫外检测器于267nm波长处检测,回归方程为y=9456.53x一5775.71,二0.9991最低检出限为o.olmg加l:回收率实验结果为97.98%一1 12.12%;实验精密度结果<l0%;在37℃,75%相对湿度条件下,连续检测90d,实验结果表明,其R、S、D百分比为4.29%,含量变化<lO%;实验方法建立成功。 2.2定性、定量测得紫丁香戒含量为96.8%与市售紫丁香戒‘试剂盒比较可以证明提取紫丁香武为纯品且性质稳定。 3.紫丁香贰降血脂实验结果 3.1紫丁香戒对大鼠体重的影响 空白对照组大鼠的体重在实验未期低于高脂对照组,空白对照组大鼠增重与高脂对照组大鼠增重相比,差异具有显著性,说明高脂动物模型建立成功。 3.2紫丁香戒对大鼠的TC影响 通过大鼠的高脂动物模型,用1.3 x10一Zmg/kg.bw.d剂量于30d对大鼠的血清TC值下降与高脂对照组比较有显著性差异(P<0.05),ooZmg/kg.bw.d剂量于1 sd和3od时大鼠的血清Te值下降与高脂对照组比较均有显著性差异,即紫丁香贰对大鼠的TC有明显的降低作用。 3.3紫丁香戒对大鼠的TG影响 通过大鼠的高脂动物模型,用0.02m眺g.bw.d剂量于30d时大鼠的血清TC值下降与高脂对照组比较有显著性差异(P<0 .05),吉林大学硕士学位论文即紫丁香戒对大鼠的TG有明显的降低作用。 3.4紫丁香武对大鼠HDL一C的影响 各剂量组大鼠的Hl)L一C与高脂对照组比较无显著差异(P>0.05)即紫丁香武对未见影响 4.紫丁香武增强免疫力实验结果 4.1紫丁香戒对小鼠体重的影响 紫丁香戒在低、中、高剂量组对免疫一组,二组,三组体重实验中和空白组对照均无显著性差异(P>0.05)即紫丁香武对小鼠体重未见影响。 4.2紫丁香贰对小鼠脏器/体重比值的影响 其脾脏/体重比值和胸腺/体重比值在低、中、高剂量组与空白对照组间比较无显著性差异(P>0.05),即对小鼠脏器/体重比值未见影响 4.3紫丁香武与迟发型变态反应 通过对小鼠给予不同剂量的紫丁香武的30d后,在中剂量组与空白对照组间比较有显著差异(P<0 .05),在高剂量组与空白对照组间比较有高度显著性差异(P<0 .01),说明随着剂量的增加,小鼠的排除异物的功能增强,即紫丁香戒能增强小鼠的迟发型变态反应。 4.4紫丁香戒对ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化实验的影响 通过对小鼠给予不同剂量的紫丁香武30d,其淋巴细胞的增殖能力在低、中、高剂量组与空白对照组间比较无显著性差异 (P>0 .05),说明紫丁香戒对Co认诱导的小鼠淋巴细胞转化能力未见影响。吉林大学硕士学位论文 4.5紫丁香武对单核一巨噬细胞吞噬碳廓清功能以及吞噬鸡细胞的能力影响 通过对小鼠给予紫丁香戒30d,其吞噬指数在低剂量组与空白对照组间比较无显著性差异(P>0.05),在中、高剂量组与空白对照组间比较有显著性差异(P<0 .05),说明紫丁香武可提高小鼠单核一巨噬细胞的碳廓清能力,而对于做为杭原的鸡红细胞,在给予不同剂量的紫丁香武30d后,其吞噬率在低、中、高剂量组与空白对照组间比较均无显著性差异(P>0.05),其吞噬指数在低、中、高剂量组与空白对照组间比较均无显著性差异(P>0.05),即紫丁香戒对小鼠的巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力未见影响。 4.6紫丁香武对小鼠杭体生成细胞数的影响 通过对小鼠给予不同剂量的紫丁香戒30d后,溶血空斑数在低剂量组与空白对照组间比较无显著性差异(P>0.05),在中剂量组与空白对照组间比较有显著性差异(P<0.05),在高剂量组与空白对照组?