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本研究以黄梁木(Neolamarckia cadamba(Roxb.)Bosser)为研究对象,以成年大树当年生半木质化带芽茎段和种子苗不同部位为外植体,采用丛生芽增殖及器官发生途径进行该树种的组织培养技术研究,取得以下主要结论:
1.利用40~45℃左右的温水或GA3浸种24h左右,可促进黄梁木种子发芽。用5%NaCIO灭菌15 min,发芽率可达91.5%。
2.3~5月采取黄梁木的嫩枝作外植体,用0.1%HgC12灭菌。灭菌时间根据枝条的软硬程度不同,在2min至15min之间。诱导培养基为:MS+6BAl.0 mg/L+KT0.05mg/L+IBA0.05 mg/L。接种后第2~3d叶柄开始形成离层,之后芽迅速膨大,第10天腋芽开始生长。但诱导污染率高,诱导成功率只有5%。
3.本研究中,无菌种子苗真叶直接分化不定芽最佳培养基为MS+6-BAl.5mg/L+IBA0.1 mg/L+30 g/L糖-I-9 g/L卡拉胶,分化率为l4.3%;最佳的胚轴不定芽分化培养基为MS+6-BA2.0mg/L+IBA0.01 mg/L+30 g/L糖+9g/L卡拉胶,分化率为6.2%。无菌种子苗子叶和真叶愈伤诱导最佳培养基为MS+2,4-D1.0 mg/L+ZT0.5 mg/L+30 9 L糖+9g/L卡拉胶,愈伤组织诱导率达100%。在MS+ZTl.5mg/L+IBA0.1 mg/L+30g/L糖+9g/L卡拉胶的培养基上,子叶不定芽分化率为20%,真叶不定芽分化率为8.3%。
4.适宜增殖培养基为MS+6-BAl.0 mg/L+IBA0.05mg/L+30g/L糖+9g/L卡拉胶,增殖系数达3.4。
5.适宜生根培养基为MS+NAA0.1 mg/L,第7d开始出根,15d内生根率达100%,平均根数为7.8条,平均根长为1.42cm。
6.以黄心土、泥炭土为栽培基质,成活率达90%以上。