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人胚胎干细胞(ESC)的成功分离培养，吸引大批人对干细胞生物学的关注，特别是ESC在再生医学及人类早期胚胎发育研究的潜在价值。然而在人ESC临床应用之前需要找到合适的动物模型进行大量的预实验研究，从而评价其应用的安全性、有效性及存活效率。因此，从其它物种建立稳定而可用的ESC系也是必不可少的。ESC能无限地自我更新并保持多潜能性，但控制其自我更新的分子机制现在仍然知之甚少且物种间存在差异，了解ESC的自我更新有利于提高建系率、改善培养体系及定向分化体系。本文一方面对ESC分离培养及自我更新机制的研究进展进行了综述，另一方面对以下几个方面的内容进行了研究：1)建立了4株稳定的兔ESC系，能在体外进行长期的培养并保持ESC的多潜能Markers及正常的XY或XX核型，具有碱性磷酸酶活性、表达Oct-4、SSEA-1、SSEA-3、SSEA-4、TRA-1-60及TRA-1-81。与人和小鼠ESC相似，兔ESC表达多潜能基因(Oct-4、Nanog、Sox-2及UTF-1)，并表达了与ESC自我更新相关的信号通路(FGF、TGFβ及WNT)的许多基因。从形态来说，兔ESC与灵长类ESC相似，但兔ESC具有较快的增殖能力，与小鼠ESC相类似。在体外及体内兔ESC均能分化成代表原始三胚层的各种细胞类型及组织。2)从受体抑制实验及生长因子的联合加入可以得出结论FGF及TGF信号通路对维持兔ESC的多潜能性发挥着重要的作用，这样的结果与人ESC相类似。也表明FGF、TGFβ及WNT信号通路在兔ESC的自我更新中都起着作用，而且他们之间可能形成了信号调控网络，相互之间有着正负反馈作用。FGF2+Activin A或TFGFβ1+Noggin的无饲养层无血清培养体系不仅能显著抑制兔ESC的分化，且能维持其长期的自我更新。但与小鼠不同，TGFβ信号通路能影响其增殖能力，而对其多潜能性的维持并没有作用。这就更说明了兔比小鼠更适宜成为人类疾病临床治疗之前的模型动物。3)四种猕猴细胞系(MOF、MESF、MFG和CMESF)可作为饲养层比MEFs(小鼠饲养层细胞)更好或同等好支持猕猴ESC的生长，保持其自我更新能力和分化的多能性。而卵泡颗粒上皮样细胞(MFGE)不能支持猕猴ESC的自我更新。进一步的研究表明饲养层支持ESC生长能力的差异可能是由于基因表达种类以及表达量上的差异而导致的。