地黄苦苷元(Reineckiagenin,REI)是从生地黄中分离出的有效单体成分,有研究证明REI属于植物雌激素具有雌激素样生物活性,有文章指出REI还具有抗炎症的作用,但其在心血管方面的研究很少,且其具体的降压及舒张血管的机制尚不明确。高血压是一种临床常见疾病,具有高死亡率和致残率。此外,高血压也是中风、冠心病、心力衰竭、肾功能不全、周围血管疾病、早期死亡和许多其它主要疾病的独立危险因素。一氧化氮(nitric oxide,NO)是血管内皮细胞分泌的舒血管物质(EDRF)之一,参与血压的生理性调节。血管内皮细胞表达的内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,e NOS),是心血管系统中NO的重要合成酶。研究表明e NOS主要通过三条信号分子通路被激活:即MEK/ERK、PI3K/Akt和c AMP/PKA信号分子途径。本研究旨在通过对经典的高血压动物模型自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)给予REI的处理,利用功能学和分子生物学等技术,在离体组织、蛋白表达等不同水平,系统的探讨REI对SHR大鼠胸主动脉舒缩功能的影响和其可能的作用机制。目的:观察REI对SHR离体胸主动脉的舒缩功能的影响,并探讨其可能的分子机制。方法:实验选用11周龄雄性的SHR大鼠以及与SHR匹配的同源的血压正常的大鼠WKY(wistar-Kyoto,WKY),应用离体血管环灌流装置以及Power Lab数据采集系统记录各组大鼠离体胸主动脉环的舒缩活动,采用蛋白免疫印迹法(Western Blot)测定各组血管组织中e NOS的蛋白含量的表达量,使用ELISA试剂盒检测各组血管组织中NO的水平。结果:1、REI可以剂量依赖性的诱导自发性高血压大鼠(SHR)和对照组大鼠(WKY)离体胸主动脉环的舒张,且对SHR胸主动脉的舒张作用明显强于WKY。去除内皮的血管或血管使用一氧化氮合酶抑制剂L-NAME预处理后则可以大部分地阻断REI的舒血管效应。2、REI可以明显的提高大鼠胸主动脉组织中e NOS的表达水平,并且浓度依赖性地提高了局部血管组织中的NO水平,且对SHR的作用强于WKY。3、应用MEK/ERK途径的阻断剂PD98059预处理后对REI舒张SHR大鼠离体胸主动脉环及激活局部血管组织e NOS的表达作用没有影响。4、应用PKA/c AMP途径的阻断剂H89预处理后对REI激活SHR局部血管组织e NOS的表达作用也没有影响。5、应用PI3K/Akt途径阻断剂LY294002预处理后则可以大部分地阻断REI对SHR大鼠离体胸主动脉环局部组织中e NOS的激活(P<0.05)。结论:地黄苦苷元通过PI3K/Akt途径激活血管内皮细胞e NOS的表达,提高局部组织中NO水平,从而诱导SHR大鼠离体胸主动脉环的舒张。