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背景与目的：肿瘤的转移是影响肿瘤患者预后的重要因素，淋巴转移是较常见的转移途径。转录辅助因子4（positivecofactor4,PC4）在肺癌发生、发展及淋巴转移中发挥重要作用。VEGF-C/D-VEGFR-3是参与肿瘤细胞淋巴转移、淋巴管生成的主要信号通路。我们前期的体外实验证实肺腺癌A549细胞中PC4与VEGF-C、VEGF-D及VEGFR-3表达呈正相关。本次研究将在裸鼠皮下移植瘤模型中进一步探讨PC4与VEGF-C/D-VEGFR-3信号通路的相关性，为以PC4为靶点的分子治疗提供依据。研究方法：20只裸鼠等分为4组，分别于左侧背部近腋窝、右侧背部近腋窝、左侧后肢和左后爪垫皮下注射肺腺癌A549细胞，分组建立皮下移植瘤模型。4周后处死，比较各组移植瘤的生长速度、淋巴转移率和裸鼠的精神状态、操作方便性等情况，筛选出最优方案。15只裸鼠等分为3组，分别将肺腺癌A549细胞（未干扰组）、稳定低表达PC4的A549-siRNAPC4细胞（干扰组）和对照A549-siRNAcontrolPC4细胞（对照组），于左侧背部近腋窝处皮下注射，建立裸鼠皮下移植瘤模型。4周后处死裸鼠，HE染色检测肿瘤淋巴结转移情况；RT-PCR检测各组瘤体PC4、VEGF-C、VEGF-D、VEGFR-3的mRNA表达情况；Westernblot检测各组瘤体与转移淋巴结组织中上述因子的蛋白表达情况；免疫组化检测瘤体PC4、VEGF-C、VEGF-D、VEGFR-3及淋巴管壁特异因子LYVE-1的蛋白表达情况。分析PC4与VEGF-C/D-VEGFR-3信号轴分子之间的相互关系。结果：背部近腋窝种植的两组裸鼠肿瘤比后肢和爪垫种植的肿瘤出现时间早，生长速度快(P<0.05)。左侧背部近腋窝、右侧背部近腋窝、左侧后肢和左后爪垫皮下移植瘤的淋巴结转移率分别为41.7%(5/12)、42.9%(6/14)、23.1%(3/13)和21.4%(3/14)。其中左侧背部近腋窝和右侧背部近腋窝组转移率明显高于其他两组（P<0.05），但左侧背部近腋窝注射较右侧更为方便。未干扰组、干扰组和对照组皮下移植瘤的淋巴结转移率分别为41.7%(5/12)、25.0%(3/12)和38.5%(5/13)。PC4表达下调后，肿瘤细胞淋巴转移率明显下降。RT-PCR和Westernblot检测结果显示，干扰组瘤体组织PC4的mRNA表达显著低于未干扰组和对照组(P<0.05)，瘤体和转移淋巴结PC4的蛋白表达显著低于未干扰组和对照组(P<0.05)。PC4表达下调后，VEGF-C、VEGF-D及VEGFR-3的mRNA表达和蛋白表达量随之下调，其在干扰组表达量低于未干扰组和对照组(P<0.05)。免疫组化检测结果显示，瘤体组织PC4、VEGF-C、VEGF-D、VEGFR-3及淋巴管壁特异因子LYVE-1的蛋白表达显著低于未干扰组和对照组。统计学分析表明，瘤组织中PC4蛋白表达与VEGF-C、VEGF-D和VEGFR-3表达正相关(r=0.991,P=0.047;r=0.997,P=0.039;r=0.986,P=0.01)；转移淋巴结组织中PC4蛋白表达与VEGF-C、VEGF-D和VEGFR-3表达正相关(r=0.982,P=0.012;r=1,P=0.02;r=1,P=0.015)。结论：1.裸鼠左侧背部近腋窝皮下注射A549细胞操作方便，肿瘤易生长，淋巴转移率高，是构建人肺腺癌皮下移植瘤淋巴转移模型的优选方案。2.在人肺腺癌A549裸鼠皮下移植瘤模型中，PC4与VEGF-C、VEGF-D和VEGFR-3的表达呈正相关。PC4可能是VEGF-C/D-VEGFR-3信号通路的上游调节因子，参与调节肺腺癌淋巴管生成，促进肺腺癌淋巴转移。