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目的:人体血压呈周期为24小时的昼夜节律(diurnal rhythm)或近日节律(circadian rhythm)。根据血压的昼夜波动情况可将其分为四型:①杓型(dippers):即夜间血压较日间下降10%～20%;②非杓型(non-dippers):夜间血压下降0%～10%;③超杓型或深杓型(over-dippers或extreme-dippers):夜间下降>20%;④反杓型(reverse-dippers):夜间血压水平高于日间者。一般认为,昼高夜低的杓型血压对于人类是相对正常健康的。大量研究显示,血压节律是独立于血压水平之外的心血管事件预测因子,节律异常的高血压患者其靶器官损害和心脑血管事件发生率显著增加。作为早期二氢吡啶类钙拮抗剂,普通硝苯地平曾是最重要的降压药物之一。近年来,鉴于其半衰期短,降压平稳性差等缺点,高血压指南不推荐其作为首选降压药物。然而普通硝苯地平疗效显著、价格低廉,结合我国尚不发达的社会经济状况,仍应依据个人情况在一般高血压患者中大力推荐使用,尤其是适用于非杓型或晨峰现象显著的高血压患者。长效降压药物基础上联合应用普通硝苯地平可能是纠正血压异常节律的新思路,这对保护靶器官免受损伤、预防心脑血管事件具有重要意义。研究表明,内皮素(ET)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合成酶(NOS)等物质的血浆浓度或活性均存在昼夜节律现象,且与血压节律密切相关。因此,充分认识其生物节律,对于深入理解血管内皮功能与血压节律的关系具有重要意义,对于改善高血压的治疗现状、减少不良心血管事件的发生具有重要价值。目前仅有少数学者对上述物质的分子表达水平的近日节律作了研究,且普通硝苯地平对内皮系统血管活性物质节律的影响亦尚待深入探讨。在此背景下,本试验通过对大鼠灌服普通硝苯地平,研究该药物对内皮源性血管活性物质昼夜节律的影响及其分子生物学机制,可以指导我们纠正异常的血压节律,这对高血压及其靶器官损害的防治有重要意义。方法:清洁级健康雄性SD大鼠64只,10周龄,体重250～300克。随机分为两大组:灌药组(T),对照组(N),每大组各32只。灌药组每日给予普通硝苯地平6mg/Kg灌胃,对照组每日给予同等容量的蒸馏水。每大组又随机分4小组,每组各8只。按上述方案饲养喂药4周后,分别于同日24小时内不同时间点(02:00、08:00、14:00、20:00)处死N组、T组中的各一小组大鼠。分别检测大鼠血浆及心肌组织ET-1、血清及心肌组织NO、eNOS的表达量以及心肌组织eNOS-mRNA的表达水平。应用余弦拟合法分析两组实验动物血清及心肌组织中各指标含量的时间生物学特征,采用零振幅检验(zero amplitude test)评价各检测指标的近日节律是否确实存在,应用t检验方法比较各均值之间差异的显著性,P<0.05表示差异有统计学意义。结果:1 t检验显示,血浆、心肌组织中ET-1表达量的昼夜平均水平:N组高于T组,并有统计学意义(p<0.05)。提示硝苯地平可以影响大鼠ET-1的表达量,灌服硝苯地平大鼠血浆、心肌组织中ET-1水平显著降低。2 t检验显示,血清、心肌组织中NO、eNOS表达量的昼夜平均水平:T组高于N组,并有统计学意义(P<0.05)。提示硝苯地平可以影响大鼠NO、eNOS的表达量,灌服硝苯地平大鼠血清、心肌组织中NO、eNOS水平显著升高。3 t检验显示,大鼠心肌组织eNOS-mRNA表达量的平均水平:T组高于N组(P<0.05)。4余弦拟合分析及零振幅检验显示,两大组大鼠血浆ET-1、血清NO、eNOS及心肌组织中ET-1、NO、eNOS的检测值均呈现出典型的昼夜节律性。N组血浆ET-1、血清NO、eNOS的峰值依次出现于22:43、10:25、07:35;T组血浆ET-1、血清NO、eNOS的峰值依次出现于21:56、08:24、05:29,T组各指标的峰值较N组提前出现,两组血浆ET-1、血清NO、eNOS振幅基本一致。N组心肌组织ET-1、NO、eNOS的峰值依次出现于02:07、14:04、12:39,T组心肌组织ET-1、NO、eNOS的峰值依次出现于01:14、12:57、11:40,T组各指标的峰值较N组提前出现。N组与T组心肌组织ET-1、NO、eNOS振幅基本一致。5余弦拟合分析及零振幅检验显示,T组、N组大鼠心肌组织中eNOS-mRNA呈现出典型的昼夜节律性。N组大鼠心肌组织中eNOS-mRNA的峰值出现于11:45,T组的峰值位于09:05。两组的振幅没有明显变化。结论:1正常大鼠血和心肌组织中ET-1、NO、eNOS的表达量存在典型的昼夜节律特征,心肌组织中eNOS-mRNA的表达也呈现明显昼夜节律。2灌服硝苯地平后,大鼠血浆、心肌组织中ET-1含量明显降低,NO、eNOS及心肌组织中eNOS-mRNA含量明显升高。大鼠血浆、心肌组织中ET-1、NO、eNOS及eNOS-mRNA的表达均显示昼夜节律,各指标的峰值时间均有所提前,但并未打乱其正常昼夜节律。