口腔肿瘤是人类最常见的肿瘤之一,舌鳞癌是最常见的口腔癌病理类型。舌鳞癌早期容易发生淋巴结转移,而侵袭迁移是造成舌鳞癌不良预后的主要原因之一。越来越多的研究证明上皮间充质转化(EMT)在肿瘤侵袭迁移过程中发挥重要作用.FoxM1是一个与细胞增殖相关的转录因子,它的很多功能主要是通过转录调节其下游的靶基因决定的。FoxM1在很多肿瘤组织中高表达,且其高表达常常提示肿瘤患者预后不佳。既往研究表明,FoxM1在肿瘤细胞EMT和侵袭迁移过程中具有重要意义。但FoxM1在舌鳞癌细胞EMT和侵袭迁移过程中的作用机制尚不十分明确。本研究发现在舌鳞癌细胞中存在FoxM1与c-Met的相互调节机制,形成一个正反馈环路促进舌鳞癌细胞EMT和侵袭迁移,并可能是AKT信号通路在舌鳞癌细胞中持续激活的一个重要因素。本研究可分为三个部分：第一部分：FoxM1与c-Met在舌鳞癌组织中的表达及临床意义。我们用免疫组织化学染色方法检测了FoxM1、c-Met和pAKT在58对舌鳞癌组织及其癌旁组织中的表达,发现FoxM1、c-Met和pAKT在舌鳞癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织。Spearman相关系数法分析结果显示,FoxM1、c-Met和pAKT三个分子中任意两分子在舌鳞癌组织中的表达正相关,具有统计学意义(p< 0.001). Fisher精确检验用于分析FoxM1、c-Met和pAKT与舌鳞癌患者临床病理学特征的关系,结果显示三个分子的表达均与舌鳞癌T分期、TNM分期、淋巴结转移相关。第二部分：FoxM1通过c-Met信号通路促进舌鳞癌上皮间充质转化及侵袭迁移的机制研究。我们在舌鳞癌细胞SCC9和SCC25中干涉FoxM1的表达后,western blot结果显示,pc-Met、c-Met、pAKT和Vimentin的蛋白表达水平有不同程度的降低,而E-cadherin的表达有所升高。Real time PCR结果显示,c-Met mRNA的表达水平随FoxM1 mRNA的下降而降低。Transwell细胞迁移和侵袭实验结果显示,在舌鳞癌细胞SCC9和SCC25中干涉FoxM1的表达后,细胞的侵袭迁移能力有了一定程度的降低,具有统计学意义。在舌鳞癌细胞SCC9和SCC25中过表达FoxM1后,western blot结果显示,pc-Met、c-Met、pAKT和Vimentin的蛋白表达水平有不同程度的升高,E-cadherin的表达有所降低。而抑制剂LY294002具有一定的逆转效应。Real time PCR结果显示,c-Met mRNA的表达水平随FoxM1 mRNA的升高而升高。LY294002则具有一定的抑制作用。Transwell侵袭和迁移实验结果显示,在舌鳞癌细胞SCC9和SCC25中过表达FoxM1后,细胞的侵袭迁移能力显著升高,而LY294002具有一定的抑制FoxM1促舌鳞癌细胞侵袭迁移的作用。利用ChiP结合PCR的方法,我们发现转录因子FoxM1在舌鳞癌细胞中能够与c-Met的DNA启动子序列结合。荧光素酶报告基因系统检测结果显示,FoxM1在舌鳞癌细胞中能显著增强c-Met的DNA启动子活性。第三部分：c-Met信号通路通过调控FoxM1促进舌鳞癌上皮间充质转化及侵袭迁移的机制研究。我们在舌鳞癌细胞SCC9和SCC25中干涉c-Met的表达后,western blot结果显示,FoxM1、pAKT和Vimentin的蛋白表达水平有不同程度的降低,而E-cadherin的表达有所升高。Real time PCR结果显示,FoxM1 mRNA的表达水平随c-Met mRNA的下降而降低。Transwell侵袭和迁移实验结果显示,在舌鳞癌细胞SCC9和SCC25中干涉c-Met的表达后,细胞的侵袭迁移能力有了一定程度的降低,具有统计学意义。在舌鳞癌细胞SCC9和SCC25中过表达c-Met后,western blot结果显示,FoxM1、pAKT和Vimentin的蛋白表达水平有不同程度的升高,E-cadherin的表达有所降低,而抑制剂LY294002具有一定的逆转效应。Real time PCR结果显示,FoxMl mRNA的表达水平随c-Met mRNA的升高而升高,LY294002则具有一定的抑制作用。Transwell侵袭和迁移实验结果显示,在舌鳞癌细胞SCC9和SCC25中过表达c-Met后,细胞的侵袭迁移能力显著升高,而LY294002具有一定的抑制c-Met促舌鳞癌细胞侵袭迁移的作用。综上所述,转录因子FoxM1在舌鳞癌细胞中能够与c-Met的DNA启动子结合,在转录水平上调节c-Met.我们还发现FoxM1、pAKT和c-Met在舌鳞癌组织中的表达显著高于癌旁组织,且这三个分子在舌鳞癌组织中共表达。FoxM1与c-Met信号通路能够相互调节,形成一个正反馈环路促进舌鳞癌细胞发生EMT和侵袭迁移。