体外培养人晶状体上皮细胞整合素的表达及维拉帕米对其表达的抑制作用

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目的:研究体外培养的人晶状体上皮细胞整合素的表达以及维拉帕米对其表达的影响。方法:对人晶状体上皮细胞株SRA01/04进行培养并传代,取对数生长期细胞用于实验。①免疫荧光法:制作细胞飞片,分5个实验组(α2、α3、α5、β1、β2)及阴性对照组,经冲洗、固定、封闭、抗体孵育后在荧光显微镜下观察各整合素在晶状体上皮细胞的表达。②流式细胞仪检测整合素的阳性表达率:制备细胞悬液并调整细胞浓度,设空白对照组、同型抗体对照组及各整合素实验组,经间接免疫荧光标记法处理细胞后上流式细胞仪检测。③维拉帕米对晶状体上皮细胞整合素表达的影响:分别以0.02mmol/L、0.04mmol/L、0.08mmol/L浓度的维拉帕米作用于晶状体上皮细胞24h、48h,同②法处理细胞后上流式细胞仪检测各整合素的阳性表达率。结果:整合素α2、α3、α5、β1、β2在晶状体上皮细胞株SRA01/04均呈阳性表达,其中整合素β1(97.7%)与α3(97.6%)的表达率最高,其次为α2(85.3%)、α5(74.0%),最低为β2(3.65%)。整合素α3与β1之间无统计学差异(X2检验,p=0.737),其余两两间比较均有显著统计学差异(X2检验,p<0.01)。维拉帕米对晶状体上皮细胞株SRA01/04整合素的表达具有抑制作用,并随药物浓度及作用时间的增加而逐渐增强(X2检验,p<0.01)。结论:整合素α2、α3、α5、β1、β2在晶状体上皮细胞株SRA01/04呈阳性表达,可能在白内障术后晶状体上皮细胞的粘附、移行、增殖过程中起促进作用,进而导致后发性白内障的发生。而钙通道阻滞剂维拉帕米对晶状体上皮细胞整合素的表达具有抑制作用,其可能阻碍整合素介导的细胞粘附、移行和增殖,有望成为防治后发性白内障的有效药物。
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