论文部分内容阅读
真菌AS5为分离白瑞香科沉香属植物白木香[Aquilaria sinensis(Lour.)Gilg]茎部的一株内生真菌,经鉴定为光黑壳属(Preussia sp.)真菌,其粗提物具有抗菌活性。本论文应用现代色谱及波谱技术,对真菌AS5的化学成分进行了研究,结合抗菌活性的跟踪,确定了该菌株的抗菌活性成分CH;应用HPLC技术,对活性成分CH的HPLC分析方法进行了初步研究;以真菌AS5的生物量和抗菌成分CH的含量为指标,采用单因子试验和正交试验,对该菌的液体发酵工艺条件进行了系统研究。(一)从真菌AS5中分离得到了分离得到了13个单体化合物,鉴定了其中的12个,它们分别为:螺光黑壳菌酮A(CH)、螺光黑壳菌酮B(EA2)、螺光黑壳菌素A(EA3)、9-羟基苯嵌萘酮(PE2)、麦角甾醇(PE1)、琥珀酸(EA1)、5-羟甲基糠醛(EA6)、D-甘露醇(B1)、阿洛糖醇(B2)、葡寡糖(B3)、尿嘧啶核苷(B5)、腺嘌呤核苷(B6),其中化合物CH、EA2、EA3为新化合物,PE2为首次从该属真菌中分离得到的化合物。(二)化合物CH具有抗菌和抗肿瘤活性,其对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的最低抑菌浓度(MIC)为8μg/mL;对人肝癌Bel-7402,人卵巢癌A2780细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为:0.95,0.77μg/mL。(三)建立了真菌AS5抗菌活性有效成分CH的HPLC定性和定量方法(四)真菌AS5液体发酵的最佳工艺条件为:培养基组成:葡萄糖20g/L,麦麸15g/L,KH2PO4 3g/L,MgSO4·7H2O 1.5g/L,初始pH 7;接种量:Φ9mm菌片4片;培养基装量:100-125mL/250mL三角瓶;培养条件:培养温度25-28℃,摇床转速120rpm,发酵周期16天,暗培养。在这一条件下培养,活性成CH的含量可达25.02mg/瓶。以上工作的开展,为真菌AS5的开发和利用奠定了理论基础。