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吉西他滨是二十世纪九十年代出现的新型脱氧胞苷类似物，在临床前及临床研究中显示了对实体瘤有较好的抗肿瘤作用。目前临床上主要用于非小细胞肺癌、乳腺癌、胰腺癌、卵巢癌等恶性肿瘤的化疗。然而，对吉西他滨的耐药是实体瘤化疗中影响疗效的主要问题。以往关于吉西他滨耐药的研究也有报道，由于吉西他滨在细胞内的作用靶点复杂，推测其耐药也是多因素的。基因芯片技术能够应用高密度的DNA微阵列同时检测上千个基因。考虑到肿瘤耐药问题的复杂性，基因芯片技术非常适用于耐药机制的研究。为此我们诱导建立了人肺腺癌吉西他滨耐药细胞系，并研究了其细胞生物学特性、交叉耐药谱，采用分子生物学方法包括基因芯片技术在人肺腺癌耐药细胞系中进行了耐药机制的研究，试图揭示肺腺癌细胞对吉西他滨产生耐药的机制，为临床用药提供理论指导。 首先我们通过逐步增加培养基中吉西他滨浓度的方法，在人肺腺癌细胞系A549中建立了对吉西他滨耐药的细胞系，命名为A549-Gem。诱导耐药的起始浓度为10nmol／L，40周后建成吉西他滨耐药细胞系A549-Gem，其在含有1μmol／L吉西他滨的培养基中稳定生长，并在无吉西他滨的培养基中培养8周后，耐药性仍保持稳定。采用四氮唑蓝(MTT)法检测了A549和A549-Gem在吉西他滨作用72小时后的半数抑制剂量(IC50)，A549的IC50为(6.56±1.19)μmol／L，A549-Gem的IC50为(921.09±225.27)μmol／L，A549-Gem对吉西他滨的耐药性为亲代细胞A549的140.52倍(p=0.0195)。集落形成实验中，根据不同药物浓度作用下形成的集落数计算出IC50，A549为1.86nmol／L，A549-Gem为247.3nmol／L，后者为前者的132.95倍。根据A549和A549-Gem的生长曲线计算出细胞的倍增时间，A549为29.68hr，A549-Gem为36.36hr。交叉耐药实验表明，A549-Gem对VCR和VP16产生交叉耐药(耐药系数分别为54.38和6.18，p＜0.01)，但对ADM、DDP、Ara-c和Taxol无交叉耐药。