猫备用背根节内源性NGF对节内神经元的营养作用

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胚胎发育中背根节部分感觉神经元的存活、生长和分化依赖于靶源性神经生长因子(nerve growth factor,NGF)的营养作用,成年后靶组织NGF的表达明显下降。成年猫脊髓部分背根传入纤维损伤后,其背角靶区内NGF的表达又明显增加,可能是诱导未受损伤的背根——备用背根纤维在脊髓内侧枝出芽的一个重要因素。与此同时,备用背根节内NGF及其mRNA的表达也显著上调,提示备用背根节内源性的NGF可能对备用背根纤维的侧枝出芽也有一定的作用。 为探讨成年猫正常背根节和部分背根损伤情况下(切断一侧L1、L3、L5、L7背根)备用背根节内源性NGF的作用和作用模式,本文采用H.E染色,免疫组织化学单、双标,酶联免疫(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和细胞培养等技术进行了以下三个方面的研究:猫背根节神经元数量和NGF及其功能性受体trkA阳性细胞百分比的基本情况;备用背根节NGF表达的变化及作用模式;备用背根节内源性NGF对节博卜论文猫备用背根节内源性NGF对节内神经元的营养作用周雪内神经元的营养作用。实验结果如一下:成年雄性猫L。一L各节段DRG左右两侧的神经元数量无显著性差异,可以互为实验组、对照组。 2.成年雄性猫L。DRG神经元数量最多,L7者最少,其余节段间无显著 性差异。 3.免疫组化单标显示,成年雄性猫DRG部分神经元表达NGF或trkA, 表明DRG内的NGF对节内神经元有一定的功能作用,NGF、trkA的 阳性细胞百分比在各节段间无显著性差异。 4.免疫组化双标显示,背根节内部分神经元既表达NGF又表达、rkA, 而部分神经元和卫星细胞仅表达NGF。表明背根节内神经元之间、 卫星细胞和神经元之间存在NGF的自分泌和旁分泌作用模式。 月切断部分背根后,备用背根节内NGF和trkA的表达都显著增强。 提示背根损伤后,备用背根节内源性NGF生成增加,并可能以自分 泌和旁分泌方式对节内部分神经元发挥作用。 6培养的备用背根节组神经元存活数量及神经突起的数量和长度明 显多于正常组和备用背根节加抗NGF抗体封闭组。表明背根节内 源性NGF有维持节内神经元存活、刺激其突起生长的作用,备用 背根节内源性NGF合成的增加,使这一作用更为强大。 本研究的结论是:成年猫背根节内源性NGF经trkA介导,以自分泌和旁分泌的模式维持节内部分神经元的存活和突起生长,部分背根损伤后备用背根节内源性NGF的增加诱导trkA平行上调,维持了节内神博}论文猫备用背根节内源性NGF对节内神经元的营养作用周雪经元‘良好的生存状态,大大促进了神经突起的生长,可能是刺激备用背根在脊髓内侧枝出芽的重要因素之一。
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