草莓具有丰富的营养,较高的药用和医疗价值,随着草莓的栽种遍布世界各地,各类侵染草莓病害也随之出现,常见的有草莓枯萎病、根腐病、炭疽病和灰霉病等,这些病害对草莓栽种和草莓果实的生产造成了巨大的损失。本实验利用组织分离法从草莓叶片中分离出一株病原细菌(SPBWSM001)。根据柯赫法则,本实验将致病菌SPBWSM001回接至草莓叶缘、叶面、茎部和根部,通过SPBWSM001对草莓各部位致病性的测定,确定SPBWSM001为草莓叶片的致病菌,并且发现该致病菌可以通过叶缘水孔、叶缘伤口和叶面伤口侵染植物,其中叶缘伤口和叶面伤口为主要侵染方式。本文随后又对致病菌SPBWSM001侵染叶缘水孔的致病温度和湿度条件进行了验证,结果显示,在30℃,95%RH条件下,SPBWSM001侵染草莓叶缘发病率最高。本实验通过观察其细胞形态学特征,测定其碳源利用、厌氧性、糖醇发酵产酸、耐盐性、水解明胶、水解淀粉、生长pH、抗生素敏感性等生理生化反应以及对16SrRNA及rpoB基因序列系统发育进行分析,最终确定病原菌SPBWSM001为嗜麦芽寡养单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)。本实验通过菌液喷施的方法测定其对黄瓜、拟南芥、番茄等植株的致病性,发现SPBWSM001对黄瓜、拟南芥以及番茄均无致病性,说明SPBWSM001只对草莓植株具有致病能力。使用不同浓度的SPBWSM001菌液对番茄进行灌根处理,观察番茄生长情况并测定不同处理组根际微生物群落动态变化。结果表明,未稀释的SPBWSM001菌液以及稀释10倍的SPBWSM001菌液对番茄株高有明显的促生作用,显著高于对照组;而不同浓度的处理液对根长及茎围均无促生作用。番茄根际的细菌和真菌数量与SPBWSM001菌液浓度呈正相关,推断这一现象与嗜麦芽寡养单胞菌SPBWSM001在根和土壤中的定殖有关。采用接合转移的方法建立了嗜麦芽寡养单胞菌大规模插入突变体,利用SPBWSM001高度耐药的特点对硫酸卡那霉素突变体进行筛选,然后运用巢式PCR对嗜麦芽寡养单胞菌SPBWSM001硫酸卡那霉素耐药基因进行鉴定,发现该突变基因为23SrRNA。本文初步研究了嗜麦芽寡养单胞菌SPBWSM001生长阶段和电击电压条件对其转化效率的影响,结果显示嗜麦芽寡养单胞菌SPBWSM001进行电击转化的最优条件为OD600=0.5,电压=20 KV/cm,且转化效率达到406 CFU/μl。