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C/EBPβ(CCAAT/enhancer-binding proteinβ),又称NF-IL6,是一个与细胞增殖和分化密切相关的转录因子。我们组曾发现,C/EBPβmRNA的3’UTR转染人肝癌恶性细胞——SMMC7721时,能引起该细胞的恶性度降低,即恶性表型逆转,这一发现后来得到了美国科学家的证实。在后来的研究中我们发现C/EBPβ3’UTR能与波形蛋白(Vimentin)、细胞角蛋白8(Cytokeratin 8,CK8)和细胞角蛋白18(Cytokeratin 18,CK18)发生专一相互作用。这里我们探讨了C/EBPβ3’UTR与细胞表型的关系以及对细胞周期的影响。我们以肝癌细胞系SMMC7721细胞和稳定转染了C/EBPβ3’UTR回复细胞系Cl1细胞为研究对象,利用免疫荧光染色、蛋白质印迹免疫分析和流式细胞仪检测的方法,初步探讨了CK18、CK8、Vimentin在两种细胞株的分布及表达特征。通过激光共焦显微镜观察免疫荧光染色后的细胞,我们发现CK18均匀地分布在7721细胞的细胞质中;而在Cl1细胞中,CK18主要集中在细胞质的核周。CK8在7721和Cl1细胞中的分布无明显差异,它们都分布在细胞质中,且在核周的表达较强。Vimentin在7721细胞中,相对均匀地分布在细胞质;而在Cl1细胞中则集中在某个特定的部位。为了更进一步观察3’UTR对这三种蛋白质分布的影响,我们将C/EBPβ3’UTR连入到绿色荧光蛋白的3’端构建出pEGFP-C2-终/280,并用该质粒转染7721细胞。我们选取不同的时间点(12h、24h、36h、48h、72h),用激光共焦显微镜观察转染了3’UTR后,上述三种蛋白的分布随时间的变化情况,结果发现转染后这三种蛋白的分布表达随时间无明显变化。但是蛋白质印迹免疫分析表明,与没有转染3’UTR的7721细胞相比,在转染24h后,转染了pEGFP-C2-终/280的7721细胞中CK18的表达量下降,CK8的表达没有明显变化,而Vimentin的表达量增加。细胞周期分析结果显示:在S期,Cl1细胞的DNA含量比7721细胞低,转染了3’UTR的7721细胞比未转染3’UTR的细胞低,说明3’UTR能够抑制细胞的DNA合成。由这些初步的结果,我们推测,C/EBPβ3’UTR能影响某些细胞骨架蛋白(如细胞角蛋白18)的分布,抑制其表达,并能抑制细胞DNA的合成。