血管内皮抑制素联合放疗对人鼻咽癌细胞CNE-2的体外实验研究

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【目的】观察血管内皮抑制素(恩度)联合放疗对人鼻咽癌细胞系(CNE2)的增殖抑制和诱导细胞凋亡的作用,及其对细胞周期的影响。为血管内皮抑制素对鼻咽癌放疗增敏的可行性提供实验依据。【方法】四噻唑蓝比色试验(MTT)观察不同浓度的血管内皮抑制素对鼻咽癌CNE2浓度时间抑制作用,计算出最适浓度。四噻唑蓝比色试验(MTT)法观察血管内皮抑制素联合放疗对鼻咽癌CNE2时间抑制作用,以流式细胞术检测对其细胞凋亡和周期的影响。【结果】1.血管内皮抑制素处理后,用倒置显微镜观察恩度处理后的鼻咽癌细胞,发现随药物及作用时间的增加,CNE2癌细胞逐渐变圆浮起,折光度降低,细胞间连接松散,增殖减慢。2.MTT法检测不同浓度的恩度在不同时间点对CNE2的增殖抑制作用。不同浓度恩度作用于鼻咽癌细胞CNE2,随着抑制剂作用浓度增加、作用时间的延长,肿瘤细胞存活率逐步降低。3.单次放疗剂量4Gy,恩度在浓度100mg/1的时候,综合治疗对鼻咽癌细胞CNE2的综合作用强,综合作用比单独用药或者放疗作用强,随时间的增加,肿瘤细胞的存活率逐步降低。4.流式细胞分析显示:人鼻咽癌细胞CNE2胞凋亡率与G2/M期百分率呈负相关,恩度可能增加了细胞G2/M的放射敏感性。5.TdT介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)法检测细胞凋亡:恩度浓度为100mg/1,单次剂量4Gy,作用72h,以PI双染色法流式细胞仪测定细胞凋亡率和坏死率,对照组细胞凋亡率仅为1.7%,细胞坏死率为8.1%,实验组细胞凋亡率为11.6%。【结论】1.一定浓度的血管内皮抑制素对人鼻咽癌细胞系(CNE2)有抑制作用,作用呈时间浓度依耐性。2.血管内皮抑制素联合放疗对人鼻咽癌细胞系(CNE2)有增敏作用,呈时间依耐性。
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