玉竹活性成分与品质分析

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以玉竹Polygonatum odoratum (Mill.) Druce为研究材料,开展了不同产区中药玉竹有效成分玉竹多糖的分离提取和比较分析,玉竹多糖体外抗氧化研究;分析测定了玉竹总皂苷、薯蓣皂苷元的含量;探讨了中药材玉竹的资源品质。此外,还对玉竹开展了良种试管快速繁殖研究,主要研究结果如下。玉竹多糖比较分析与抗氧化研究:采用热水浸提法、Sevag法除蛋白质、乙醇沉淀获得玉竹多糖,用苯酚-硫酸比色法测得多糖含量,并对10个产区玉竹多糖含量进行比较分析。分析结果表明,不同产地玉竹药材中多糖含量有差异,江西产玉竹多糖含量最高,达11.89%;河北玉竹多糖含量最低,仅为6.37%。不同产地玉竹多糖含量顺序为:江西>四川>湖南>黑龙江>内蒙古>陕西>安徽>广西>山西>河北。采用体外化学体系,研究玉竹多糖对超氧阴离子(O2-?)、羟自由基(?OH)、1,1-二苯基-2苦苯肼自由基(DPPH?)和过氧化氢(H2O2)的清除能力。结果表明,玉竹多糖对超氧阴离子(O2-?)和过氧化氢(H2O2)有显著的体外抗氧化作用,对羟自由基(?OH)和1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPPH?)有一定的清除活性。玉竹总皂苷和薯蓣皂苷元的研究:分光光度法为测定总皂苷的主要手段,并建立了测定玉竹薯蓣皂苷元的HPLC方法,色谱柱:C18(3.9*150mm);流动相:甲醇-水(88∶12);流速:1.0mL/min;柱温:25℃;检测波长:210nm;进样量:10.0μl。在此色谱条件下,薯蓣皂苷元与其他组分有较好的分离度。分析结果表明,四川产地玉竹的总皂苷含量最高,为3.63%;黑龙江产地玉竹的总皂苷含量最低,为1.65%。不同产地玉竹总皂苷含量顺序为:四川>河北>湖南>内蒙古>广西>山西>安徽>江西>陕西>黑龙江。而薯蓣皂苷元含量较低,仅有0.031%-0.053%。玉竹组织培养与快繁研究:以玉竹根状茎、叶片和茎段为外植体,于附加不同激素配比的MS培养基中诱导愈伤组织、不定芽和不定根,探讨组织培养与快繁的条件。筛选出根状茎外植体有较高的诱导率和增殖倍数,其愈伤组织、不定芽和不定根的诱导、分化培养基分别为MS+BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1,MS+BA 2.0 mg·L-1 +IBA 0.5 mg·L-1,MS+BA 3.0 mg·L-1+ NAA 0.1 mg·L-1和1/2MS+NAA 3.0-5.0 mg·L-1。通过研究,建立了玉竹多糖体外抗氧化体系;建立了测定玉竹薯蓣皂苷元的HPLC方法;确立了玉竹离体快繁的培养条件。玉竹多糖是药材玉竹的主要活性成分,比较分析结果显示,不同产区的玉竹多糖含量差异明显,可以作为玉竹品质评价主要指标。不同产区的玉竹总皂苷含量也有明显差异,但因薯蓣皂苷元含量较低,不易被检测。
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