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目的:应用RNA干扰技术使癌基因ILK获得特异性沉默，通过抑制ILK基因表达来提高卵巢癌细胞系及裸鼠皮下移植瘤的放疗敏感性，从而进一步探讨基因联合放疗的方法共同治疗卵巢癌的可行性，为无法行手术治疗的晚期卵巢癌患者及术后和/或化疗后有肿瘤残存的卵巢癌患者的治疗提供新的研究方向和理论依据。 方法:应用基因工程技术构建重组质粒ILK-shRNA;应用脂质体转染技术使ILK-shRNA质粒转染卵巢癌HO-8910细胞，获得稳定表达ILK-siRNA的卵巢癌HO-8910细胞。本研究将体外细胞实验与裸鼠体内实验相结合。 体外细胞实验部分分6组，依次为:对照组（A组）、无关质粒转染组(B组)、ILK-siRNA组（ILK-shRNA质粒转染组，C组）、对照+照射组（D组）、无关质粒转染+照射组（E组）、ILK-siRNA+照射组（F组）。将转染后的各组细胞接种培养，48h后对D、E、F组细胞进行2Gy剂量照射。照射后24h收集6组细胞，运用RT-PCR和Western-bllot方法检测ILK的mRNA及蛋白表达;运用WST-1法检测细胞体外增殖抑制率;运用流式细胞术采用AnnexinⅤ-FITC和PI联合标记法检测细胞凋亡率;运用Millicell小室检测细胞侵袭和迁移能力;运用黏附能力实验检测细胞黏附率。 裸鼠体内实验第一部分即卵巢癌细胞裸鼠皮下成瘤能力的抑制实验。将36只裸鼠随机分成6组（每组6只），分组同体外细胞实验部分。将转染不同质粒的6组细胞培养48h后，室温条件下进行2Gy/d剂量照射，连续照射3天;照射后24h将6组细胞分别接种于6组裸鼠右肩背部皮下。目检裸鼠成瘤时间，定期测量裸鼠体重、移植瘤体积及体积抑瘤率、移植瘤重量及重量抑瘤率，计算肿瘤生长延迟(TGD)时间、校正的肿瘤生长延迟(NGD)时间和增敏系数(EF)。 裸鼠体内实验第二部分即裸鼠皮下卵巢癌移植瘤的治疗实验。将卵巢癌HO-8910细胞接种于36只裸鼠右肩背部皮下，待裸鼠移植瘤最长径长到5mm后，将36只荷瘤裸鼠随机分成6组（每组6只），分组同体外细胞实验部分。分别向A和D组裸鼠瘤体注射转染液，向B和E组注射无关质粒，向C和F组注射ILK-shRNA质粒;注射治疗后4h对D、E、F组裸鼠进行2Gy剂量的肿瘤局部照射;每天重复治疗1次，连续治疗5天。定期测量裸鼠体重、移植瘤体积及体积抑瘤率、移植瘤重量及重量抑瘤率，计算TGD、NGD和EF。 结果: 体外细胞实验部分 1.C、D、E及F组细胞ILK的mRNA和蛋白表达均出现明显下降;C组与A、B组比较差异均具有统计学极显著意义(P＜0.01);F组与D组相比ILK的mRNA和蛋白表达出现更显著下降，差异均具有统计学极显著意义(P＜0.01)。 2.C、D、E及F组的细胞增殖抑制率明显增高，细胞黏附百分率明显下降;C组的吸光度A值与A、B组比较，差异均具有统计学极显著意义(P＜0.01);F组与D组比较差异均具有统计学极显著意义(P＜0.01);F组细胞增殖抑制率的增高幅度和细胞黏附率的下降幅度均超过C和D组单作用因素的叠加。 3.C、D、E及F组的细胞凋亡率明显增高，侵袭和迁移细胞数明显减少;C组的凋亡、侵袭和迁移细胞数与A、B组比较，差异均具有统计学极显著意义(P＜0.01);F组与D组比较差异均具有统计学极显著意义(P＜0.01);F组的细胞凋亡率、侵袭和迁移细胞数的减少均超过C和D组单作用因素的叠加。 裸鼠体内实验第一部分 1.C、D、E及F组裸鼠首次出现目检可见肿瘤的时间均明显延长;C组与A、B组比较差异均具有统计学极显著意义(P＜0.01);F组与D组比较差异具有统计学极显著意义(P＜0.01)。 2.C、D、E及F组裸鼠皮下移植瘤的体积随时间延长各有不同程度增长，但与A、B组比较有明显的生长延迟。接种后不同时间C组裸鼠的皮下移植瘤体积与A、B组比较，差异均具有统计学极显著意义(P＜0.01);F组与D组比较差异均具有统计学极显著意义(P＜0.01);同时，C、D、E和F组的体积抑瘤率随接种时间的延长而不断降低，但F组的体积抑瘤率远大于C组和D组在同一时间单因素的作用效率。 3.C、D、E及F组裸鼠皮下移植瘤的瘤体重量明显下降;C组裸鼠的移植瘤重量与A、B组比较，差异均具有统计学极显著意义(P＜0.01);F组与D组比较差异具有统计学极显著意义(P＜0.01);F组的重量抑瘤率远大于C组和D组单因素的作用效率。 4.TGD为1.5天;NGD为3.3天;EF为2.2。 裸鼠体内实验第二部分 1.C组裸鼠的皮下移植瘤体积随时间延长呈不同程度增长，D、E及F组呈现先抑制后增长趋势，但这4组裸鼠移植瘤体积的增长与A、B组相比均有明显的生长延迟。治疗后不同时间C组裸鼠的移植瘤体积与A、B组比较，差异均具有统计学极显著意义(P＜0.01);F组与D组比较差异均具有统计学极显著意义(P＜0.01);同时，C、D、E和F组的体积抑瘤率均随时间的延长而不断降低，但F组的体积抑瘤率远大于C组和D组在同一时间单因素的作用效率。 2.C、D、E及F组裸鼠皮下移植瘤的瘤体重量明显下降;C组皮下移植瘤重量与A、B组比较，差异均具有统计学极显著意义(P＜0.01);F组与D组比较差异具有统计学极显著意义(P＜0.01);F组的重量抑瘤率远大于C组和D组单因素的作用效率。 3.TGD为6.9天;NGD为12.3天;EF为1.8。 结论:应用基因工程技术成功构建ILK-shRNA质粒，成功转染并获得稳定表达ILK-siRNA的卵巢癌HO-8910细胞。通过体外细胞实验证实ILK-siRNA能够提高卵巢癌细胞的放疗敏感性，即ILK-siRNA能够增强放疗对细胞ILK mRNA及蛋白表达的抑制作用;增强放疗对细胞增殖的抑制作用;增强放疗对细胞凋亡的诱导作用;增强放疗对细胞侵袭、黏附、迁移能力的抑制作用。通过裸鼠体内实验证实ILK-siRNA能够提高卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的放疗敏感性，即ILK-siRNA能够增强放疗对卵巢癌细胞体内成瘤能力的抑制作用;增强放疗对卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用。