第一部分不同胚胎期心外膜祖细胞的体外培养目前通过胚胎小鼠心室爬片获得心外膜祖细胞的胚胎期并不统一,E10.5-E13.5胚胎心室都有用来培养心外膜祖细胞。目的:探讨如何成功培养不同胚胎期的心外膜祖细胞。方法:我们选择E11.5、E13.5、E15.5胚胎小鼠心室来诱导心外膜祖细胞的爬出,并通过PCR和免疫细胞荧光鉴定其性质。结果:从E11.5、E13.5、E15.5胚胎心室成功培养出心外膜祖细胞。E11.5、E13.5、E15.5心外膜祖细胞爬出需要不同培养时间窗。结论:可以根据不同的实验目的适宜地选择不同胚胎期的心室来培养心外膜祖细胞。第二部分探究不同胚胎期心外膜祖细胞之间生物学特性的差异从心外膜早期形成到成年,心外膜细胞一直经历着胚胎期基因表达的动态变化,与其相联系的是心外膜细胞特性的改变。目前研究尚未明确各胚胎期心外膜祖细胞的生物学特性差异,而该差异可能对心外膜祖细胞相关的实验研究存在影响。目的:探究不同胚胎期的心外膜祖细胞生物学特性的差异。方法:通过划痕实验、流式细胞周期分析以及PDGF-BB诱导分别研究不同胚胎期心外膜祖细胞的迁移、增殖及分化特性的差异。结果:E11.5、E13.5、E15.5心外膜祖细胞的迁移能力随胚胎发育不断降低。E11.5、E13.5、E15.5心外膜祖细胞的增殖能力总体上无差别。早期心外膜细胞较晚期心外膜细胞更容易表达平滑肌标志物,其祖细胞特性更好。结论:不同胚胎期心外膜祖细胞有着不同的生物学特性,为避免不同胚胎期生物特性差异的影响,同一实验应选择同一胚胎期心室来培养心外膜祖细胞。