赭曲霉毒素A的CdSe/ZnS量子点免疫—荧光检测探针构建

来源 :西北农林科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fancysoul
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
真菌毒素具有非常大的危害性,其在自然界中分布广泛,是食品安全的潜在威胁。有关真菌毒素检测技术的研究一直以来都是研究热点。目前,已报道的常用检测方法多存在样品前处理复杂、设备昂贵、耗时等缺点,不利于大量样品的检测处理。因而,建立新型、快速、灵敏度高的检测方法具有很大的意义。量子点具有荧光产率高、光稳定性强、荧光寿命长、生物相容性好、激发波长范围宽等优点,在生物芯片、蛋白质及DNA检测、靶向示踪等方面有广泛的应用。本文将荧光量子点分析技术与纳米探针技术、免疫分析技术结合,构建了一种赭曲霉毒素A的CdSe/ZnS量子点免疫荧光检测方法,该法可以实现小麦面粉中赭曲霉毒素A的定量测定。本研究以EDC为活化剂,将表面修饰羧基的CdSe/ZnS核壳量子点活化后与赭曲霉毒素A的单克隆抗体偶联。采用紫外光照射、SDS-PAGE凝胶电泳和荧光光谱对偶联物进行表征,结果表明量子点与抗体偶联成功,形成了检测探针。以pH、量子点与抗体摩尔浓度比为指标对检测探针的制备条件进行了优化,结果表明检测探针制备的最佳pH为7.0,量子点和抗体的最佳配比为1.3:1。本研究制备的检测探针在低温保存3d和6d后,探针的荧光强度分别降低了 10.3%和47.3%,表明制得的检测探针短期保存时具有一定的稳定性。在优化条件下,利用制备的检测探针对一系列梯度浓度的赭曲霉毒素A标准品溶液进行测定以构建检测工作曲线。结果显示,检测线性范围为1.0×10-10 g/mL~9×10-10 g/mL,检出限为1.77×10-11g/mL。分别用国标法和构建方法检测4个不同浓度的赭曲霉毒素A标准品,对比检测结果发现具有良好的相关性,表明构建方法具有可行性。在标准赭曲霉毒素A中分别混入呕吐毒素和黄曲霉毒素,利用检测探针对混合样中赭曲霉毒素A进行检测,结果显示变异系数仅为2.63%,表明干扰毒素的加入对检测探针检测赭曲霉毒素A没有影响,因此本研究构建的检测探针具有良好的特异性。根据检测探针对小麦面粉加标前后赭曲霉毒素A的检测结果来评价该方法的准确性,结果显示回收率在96.0%~102.7%之间,方法具有较好的准确性。本研究构建的荧光量子点免疫检测方法可以满足快速检测方法的基本要求,在赭曲霉毒素A的快速检测上显示出较好的应用前景。
其他文献
1匈牙利羊毛猪Mangaritsutsa猪是一种罕见的原产于匈牙利的披着绵羊皮的'羊毛猪'。被毛跟绵羊一样,让人乍看之下会误以为是绵羊,但它的嘴和蹄与猪一样,这就是欧洲濒
教师的观念转变是新课程改革顺利进行的重要保证,然而,中国特定的教育传统、西方经典教育理论、教师自身教学经验及教师参与课程改革制定方案的力度不够等问题,在不同程度上成为
鞍钢集团通过深入剖析数字化、智能化发展趋势,对标国内外同行业先进制造企业,构建出了企业数字化能力蓝图,将数字化平台架构、数据智能授权、业务自动化、敏捷生产、智慧管理与
报纸
网络外卖,又称互联网外卖,作为新型的订餐服务模式正受到学生、办公室白领、“宅男宅女”们的广泛青睐。然而,因其所依托的网络平台的隐蔽性、虚拟性、交易主体与对象的广泛性、多样性等特点,如今网络外卖市场正衍生出一系列食品安全问题引人瞩目。对我国网络外卖食品安全的监管力度与监管维度直接决定了该市场能否健康持续繁荣发展,以及消费大众的健康与安全能否得以保障。我国网络外卖食品安全监管的立法问题与行政执法问题的
伴随我国社会经济发展速度的提升和各行业产业在发展期间对能源资源消耗量的增加,使得矿山资源总开采量和开采频率也在不断增多。而作为我国高危职业之一,矿山生产过程中最主
文章提出“工业文化融入高职院校思想政治理论课教学”新问题,要用社会主义先进文化之一的工业文化武装高职学生头脑必须充分发挥思想政治理论课教学的主渠道和主阵地作用。借
<正>电子管风琴被形象的喻为"一个人的交响乐队",这一乐器擅长表现包括巴洛克复调音乐、古典音乐、近现代音乐乃至新时代音乐等不同流派、不同风格的音乐作品。目前国内各大
<正>"别书人"一词,见于徐浩《古迹记》,为负责搜集、甄别、管理集贤院法书珍藏的专门人才。弘文馆和集贤院为唐代两大文馆,贞观初期,太宗更名文学馆为弘文馆,他所珍爱的魏晋
本文针对福州市中学体育发展的现状和问题进行分析,对福州市中学体育发展的经验进行总结。采用文献资料法、调查法、访谈法等研究方法,研究认为,福州市中学体育发展的经验包
为了探究太原市园林植物春季固碳释氧和降温增湿效应,选取了6类34种园林植物,通过定量计算,对其固碳释氧和降温增湿能力进行了初步评估和分类评价。结果表明,单位叶面积固碳